第二十四章　出凝血试验的自动化

　　凝血仪的检测原理和方法

　　1.凝固法

　　也称为生物学法，将凝血因子或激活剂加入到血浆中，使血浆发生凝固，凝血仪记录血浆凝固过程中一系列的变化(如光、电、机械运动等)，并将这些变化的信号转变成数据，计算机处理分析后得出检测结果。目前在凝血仪上使用的凝固法大致分为三类：光学法、黏度法和电流法。

　　(1)光学法：待测血浆在凝固过程中，纤维蛋白原逐渐转变为纤维蛋白，其理学性质也发生改变，透射光和散射光强度发生改变，凝血仪根据这种光学性质的改变来判断凝固终点。光学法可分为透射比浊法和散射比浊法。

　　(2)黏度法：在待测血浆中加入小磁珠，利用变化的磁场使小磁珠产生运动，随血浆的凝固，血液黏度增加，小磁珠的运动逐渐减弱，仪器根据小磁珠运动强度的变化来确定凝固终点。

　　(3)电流法：该法将待测血浆作为电路的一部分，由于纤维蛋白具有导电性，可利用电流的断与否来判断纤维蛋白的形成与否，即判断凝固终点。

　　2.发色底物法

　　该法主要是利用测定产色物质的吸光度变化来推算所测定物质的含量。基本原理为：首先人工合成含某种活性酶裂解点的化合物，此化合物上连接有产色物质(如对硝基苯胺，PNA)，待测血浆中含有活性酶或往样品中加入活性酶，化合物中的产色物质可被裂解下来，使待测样本出现颜色变化，根据此颜色变化可推算出被检物质的含量。一般产色物质选用PNA，游离的PNA呈黄色，测定波长为405nm，而连接PNA的化合物为无色。利用该法检测的物质有ATⅢ、PLG、PC、PS等。

　　3.免疫学法

　　利用抗原抗体的特异性结合反应来对被测物质进行定量。自动凝血仪多采用免疫比浊法进行测定，又分为透射免疫比浊法和散射免疫比浊法。

　　利用该法检测的物质有D-二聚体等。

　　患者男性，15岁。发热3天，有上呼吸道感染史。并出现双下肢皮肤紫癜。实验室检查：Hb120g/L，WBC 5.5×109/L，PLT 120×109/L;束臂试验阳性，凝血酶原时间12s(对照12s)，血块收缩良好，纤维蛋白原定量3.5g/L，该患者最可能的诊断是

　　A.过敏性紫癜

　　B.血友病

　　C.遗传性纤维蛋白原缺陷症

　　D.DIC

　　E.原发性血小板减少性紫癜

　　『正确答案』A

　　『答案解析』由题干可知该患者双下肢皮肤紫癜，束臂试验阳性，其余检查指标均正常，所以判断为过敏性紫癜。

　　临床上以肌肉和关节腔出血为主要表现的患者，应选用的筛选试验是

　　A.出血时间，血小板计数，血小板功能试验

　　B.凝血时间，出血时间，纤维蛋白原测定

　　C.活化部分凝血活酶时间，出血时间，凝血酶原时间

　　D.束臂试验，出血时间，血小板计数

　　E.血小板计数，凝血酶时间，纤维蛋白测定

　　『正确答案』C

　　『答案解析』临床上以肌肉和关节腔出血为主要表现的患者是因为凝血因子异常导致的，所以该题选C选项。

　　男性，30岁，轻微外伤后，臀部出现一个大的血肿。病人既往无出血病史，其兄有类似出血症状。检验结果：血小板300×109/L;APTT66秒(对照50秒);PT15秒(对照13秒);TT19秒(对照19秒);Fg3.6g/L。该患者最可能的诊断是

　　A.ITP

　　B.血友病

　　C.遗传性因子ⅩⅢ缺乏症

　　D.DIC

　　E.血小板减少性紫癜

　　『正确答案』B

　　『答案解析』由题干可知该患者检查结果只有APTT异常，其余检查均正常。ITP血小板计数明显减低，所以可以排除A选项;遗传性因子ⅩⅢ缺乏症APTT和PT正常，所以可以排除C选项;DIC时血小板低于100×109/L，所以可以排除D选项。血小板减少性紫癜是一种以血小板减少为特征的出血性疾病，所以可以排除E选项。

　　在口服抗凝药的起始阶段，首先迅速减低的凝血因子是

　　A.FⅡ

　　B.FⅦ

　　C.FⅨ

　　D.FⅩ

　　E.FⅪ

　　『正确答案』B

　　『答案解析』在口服抗凝药的起始阶段，首先迅速减低的凝血因子是FⅦ。