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2020年临床初级检验技师考试《血液学检验》考点:第十章

来源 :中华考试网 2019-11-10

第十章 急性髓细胞白血病

  AML-M1,M2,M3,M4,M5,M6,M7的实验诊断

  一、M1的实验诊断

  1.血象 贫血显著,血红蛋白<60g/L,外周血可见幼红细胞,白细胞总数升高。血片中以原始粒细胞为主,少数患者可无或极少幼稚粒细胞出现。血小板中度到重度减少。

  2.骨髓象 骨髓增生极度活跃或明显活跃,少数病例可增生活跃甚至减低。骨髓中原始粒细胞大于90%(NEC),白血病细胞内可见Auer小体,幼红细胞及巨核细胞明显减少,淋巴细胞也减少。

  3.细胞化学染色 POX染色至少有3%原粒细胞POX阳性。

  AML-M1骨髓象

  A.POX染色弱阳性B.视野中可见原始粒细胞C.视野中全部为原粒(与B图为不同患者)

  4.免疫学检验 本型往往显示HLA-DR、MPO、CD34、CD33及CD13阳性,CD11b、CD15阴性。CD33阳性者CR率高,CD13阳性、CD33阴性者CR率低。

  5.染色体和分子生物学检验 核型异常。Ph染色体t(9;22)形成BCR-ABL融合基因,约见于3%的AML,大多为M1型。

  二、M2a的实验诊断

  1.血象 贫血显著,白细胞中度升高和M1相似,以原始粒细胞及早幼粒细胞为主。血小板中度到重度减少。

  2.骨髓象 骨髓增生极度活跃或明显活跃,骨髓中原始粒细胞占30%~89%(非红系),早幼粒、中幼粒和成熟粒细胞大于10%,白血病细胞内可见Auer小体,幼红细胞及巨核细胞明显减少,此型白血病细胞的特征是形态变异及核质发育不平衡。

  AML-M2a骨髓象

  A.视野中可见原粒和早幼粒 B.白血病细胞胞浆中可见Auer小体

  3.细胞化学染色

  (1)POX与SB染色:均呈阳性反应。

  (2)PAS染色:原粒呈阴性反应,早幼粒细胞为弱阳性反应。

  AML-M2a POX染色,白血病细胞为强阳性。

  (3)中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP):成熟中性粒细胞的NAP活性明显降低,甚至消失。

  (4)特异性和非特异性酯酶染色:氯醋酸AS-D萘酚酯酶染色呈阳性反应。醋酸AS-D萘酚酯酶染色(AS-D-NAE)可呈阳性反应,但强度较弱,且不被氟化钠抑制。

  (5)Phi(Ф)小体染色:原始和幼稚粒细胞内出现Phi(Ф)小体。

  4.免疫学检验 表达髓系抗原,可有原始细胞和干细胞相关抗原,CD34、HLA-DR、CD13、CD33和CD57阳性。

  5.染色体和分子生物学检验 特异性染色体重排t(6;9)约见于1%的AML,主要为本型所见,该染色体的重排易产生融合基因(DEK-CAN)。

  三、M2b的实验诊断

  1.血象 多数病例为全血细胞减少。血红蛋白及红细胞数均减低,常较其他类型白血病更为明显。白细胞数大多正常或低于正常,随着病情的进展或恶化,多数患者的白细胞数常有增高的趋势。血小板明显减少,形态多异常。

  2.骨髓象 骨髓多为增生明显活跃或增生活跃,红细胞系与巨核细胞系增生均减低。粒细胞系增生明显活跃,原始粒细胞与早幼粒细胞明显增多,以异常中性中幼粒细胞为主,≥30%(NEC),异常中性中幼粒细胞形态特点是胞核与胞质发育极不平衡。

  AML-M2b骨髓象,可见原粒、早幼粒及异常中性中幼粒。

  3.细胞化学染色 ①POX及SBB染色呈阳性或强阳性反应;②AS-D-NCE染色阳性;③α-NBE阴性;④NAP染色其活性明显减低。

  AML-M2b细胞化学染色

  A.POX染色阳性B.AS-D-NCE染色阳性

  4.免疫学检验 CD33、CD13阳性率减低,而表达更成熟的髓系抗原CD15和CD11b阳性率增高。白血病分化阻滞阶段较M2a晚。

  5.遗传学和分子生物学检验 t(8;21)(q22;q22)易位是M2b的一种常见非随机染色体重排,其检出率高达90%。t(8;21)染色体易位导致AML1基因重排可作为本病基因诊断的标志。

  四、M3的实验诊断

  1.血象 血红蛋白及红细胞数呈轻度到中度减少,部分病例为重度减少。白细胞计数大多病例在15×109/L以下,分类以异常早幼粒细胞为主,可高达90%,Auer小体易见。血小板中度到重度减少。

  2.骨髓象 多数病例骨髓增生极度活跃,个别病例增生低下。分类以颗粒增多的早幼粒细胞为主,占30%~90%(NEC),早幼粒细胞与原始细胞之比为3:1以上。幼红细胞和巨核细胞均明显减少。

  3.细胞化学染色 POX、SB、AS-D-NCE和ACP染色均呈阳性或强阳性反应。AS-D-NAE可呈阳性反应,但不被氟化钠抑制,α-萘酚丁酸酯酶染色阴性,依次可与急单作鉴别。

  AML-M3骨髓象 A.典型的颗粒增多的早幼粒细胞

  B.变异型的早幼粒细胞,胞浆颗粒少 C.“柴捆细胞”

  AML-M3 细胞化学染色

  A.POX染色呈强阳性反应B.AS-D-NCE染色阳性

  4.免疫学检验 髓系标志为主而HLA-DR、CD34为阴性者CD13、CD33、MPO、CD68等阳性。

  5.染色体及分子生物学检验 约70%~90%的APL具有特异性的染色体易位t(15;17),是APL特有的遗传学标志,t(15;17)染色体易位使17号染色体上的维甲酸受体α(RARα)基因发生断裂,与15号染色体上的早幼粒细胞白血病(PML)基因发生融合,形成PML-RARα融合基因。

  AML-M3之t(15;17)染色体易位形成PML-RARα融合基因示意图

  五、M4型的实验诊断

  1.血象 血红蛋白和红细胞数为中度到重度减少。白细胞数可增高、正常或减少。外周血可见粒及单核两系早期细胞,原单核和幼单核细胞可占30%~40%,粒系早幼粒细胞以下各阶段均易见到。血小板呈重度减少。

  2.骨髓象 骨髓增生极度活跃或明显活跃。粒、单核两系同时增生,红系、巨核系受抑制。包括两种类型:

  (1)异质性白血病细胞增生型:白血病细胞分别具有粒系、单核系形态学特征。

  (2)同质性白血病细胞增生型:白血病细胞同时具有粒系及单核系特征。部分细胞中可见到Auer小体。

  本病可分为4个亚型:M4a、M4b、M4c、M4Eo。

  AML-M4骨髓象

  A.M4a,可见粒、单两系细胞;B.M4b,可见粒、单两系细胞,部分细胞胞浆中可见Auer小体;C.D.M4Eo可见异常嗜酸粒细胞。

  3.细胞化学染色

  (1)POX、SB染色:原单和幼单细胞呈阴性或弱阳性反应,而幼粒细胞呈阳性或强阳性反应。

  (2)非特异性酯酶染色:应用α醋酸萘酚为底物进行染色,原始和幼稚细胞呈阳性反应,其中原粒细胞不被氟化钠(NaF)抑制,而原单细胞可被NaF抑制。

  (3)酯酶双重染色:可呈现醋酸萘酚酯酶阳性细胞、氯醋酸酯酶阳性细胞或双酯酶阳性细胞。

  AML-M4 酯酶双染色

  胞浆呈蓝色的为粒系细胞;胞浆呈红褐色的为单核系细胞。

  4.免疫学检验 白血病细胞主要表达粒、单系抗原CD13、CD14、CD33、HLA-DR,部分表达CD9。

  六、M5的实验诊断

  1.血象 血红蛋白和红细胞数呈中度到重度减少,大多数患者白细胞数偏低,分类以原单和幼单核细胞增多为主,可占细胞总数的30%~45%。未分化M5a以原单细胞为多、部分分化型M5b以幼单和单核细胞为主。两型血小板均重度减少。

  2.骨髓象 骨髓增生极度活跃或明显活跃。原单加幼单细胞大于30%。M5a以原单细胞为主,可大于80%(NEC或单核系细胞),幼单细胞较少。M5b中原单、幼单及单核细胞均可见到,原单细胞小于80%。白血病细胞中有时可见到1~2条细而长的Auer小体。

  AML-M5骨髓象

  A.M5a视野中均为原始单核细胞;B.M5b视野中大部分细胞为幼稚单核细胞。

  3.细胞化学染色

  (1)POX和SB染色:原单核细胞是阴性和弱阳性反应,而幼单细胞多数为阳性反应。

  (2)PAS染色:原单细胞多数为阴性反应。半数呈细粒状或粉红色弱阳性反应,而幼单细胞多数为阳性反应。

  (3)酯酶染色:非特异性酯酶染色阳性,可被氟化钠抑制,其中α-丁酸萘酚酯酶(α-NBE)染色诊断价值较大。

  AML-M5细胞化学染色 A.POX染色原单为阴性反应;

  B.PAS染色幼单为弱阳性反应;C.α-NBE染色幼单为阳性反应。

  七、M6的实验诊断

  1.血象

  (1)红血病期:贫血轻重不一,随着疾病的进展而加重。可见各阶段的幼红细胞,以原红和早幼红细胞为主,幼红细胞的形态奇特并有巨幼样变。白细胞数低于正常,随着病程的发展白细胞数可增多。血小板常减低。

  (2)红白血病期:血红蛋白和红细胞数大多由中度到重度减少。见到各阶段的幼红细胞,以中、晚幼红细胞为多,且形态异常。白细胞数一般偏低,可见原粒及早幼粒细胞,随着病程的发展,部分病例后期发展为急性髓细胞白血病;其血象也随之而改变,此时幼红细胞逐渐减少。血小板减少明显,可见畸形血小板。

  2.骨髓象

  (1)红血病期:骨髓增生极度活跃或明显活跃。以红系增生为主。多数病例红系大于50%,粒红比例倒置,原红及早幼红多见。异形红细胞超过10%,则骨髓中红系细胞占30%即有诊断意义。

  AML-M6红血病期骨髓象

  A.巨幼样变的各阶段幼红细胞B.核分裂异常的幼红细胞

  (2)红白血病期:骨髓增生极度活跃或明显活跃。红系和粒系(或单核系)细胞同时呈恶性增生。大部分病例以中晚幼红细胞为主,原红、早幼红细胞次之。白细胞系统明显增生,原粒(或原单核+幼单核)细胞占优势,大于30%(NEC),部分原始和幼稚细胞中可见Auer小体。

  AML-M6红白血病期骨髓象

  A.原粒细胞胞浆中可见Auer小体 B.视野下可见较多原粒细胞

  3.细胞化学染色 幼红细胞PAS呈强阳性反应,积分值明显增高,且多呈粗大颗粒、块状、环状或弥漫状分布。

  AML-M6 PAS染色,幼红细胞呈粗大颗粒状阳性反应

  八、M7的实验诊断

  1.血象 常见全血细胞减少。白细胞总数大多减低,少数正常或增高,血小板减少。少数病例正常。可见到类似淋巴细胞的小巨核细胞,有核红细胞可见。

  2.骨髓象 骨髓象增生明显活跃或增生活跃。粒系及红系细胞增生均减低。巨核细胞系异常增生,全片巨核细胞可多达1000个以上,以原始及幼稚巨核细胞为主。其中原始巨核细胞大于30%,根据分化程度分未成熟型和成熟型两种亚型。未成熟型以原始巨核细胞增多为主;成熟型则原始巨核至成熟巨核细胞同时存在。

  AML-M7骨髓象,可见原始及幼稚巨核细胞

  3.细胞化学染色 有价值的细胞化学染色是5′-核苷酸酶、ACP和PAS均为阳性,酯酶染色α-NAE阳性,并可被NaF抑制,MPO及SB染色阴性。

  AML-M7 CD41染色巨核细胞呈阳性反应

  急性髓细胞白血病的分型标准与细胞化学染色

亚型

分型标准

细胞化学染色

POX

α-NAE

PAS

酯酶
双染色

M1

原粒(≥90%)未分化型

(+)-(+++)

(-)-(+)
NaF抑制不敏感

 

 

M2

原粒部分分化型

 

 

M2a

原粒30%~90%
单核细胞<20%

 

 

M2b

异常中性中幼粒>30%

 

 

M3

异常早幼粒细胞>30%

 

 

M4

粒-单核细胞白血病

 

 

 

(+)

M5

单核细胞白血病

(-)-(+)

(+)被NaF抑制

 

 

M6

红白血病

 

 

(+)

 

M7

巨核细胞白血病

 

(+)被NaF抑制

 

 

  急性髓细胞白血病FAB分型与免疫标志

抗体

M1

M2

M3

M4

M5

M6

M7

HLA-DR

+/-

+/-

CD34

+/-

+/-

+/-

+/-

CD33

+/-

+/-

CD13

+/-

未报告

CD14

+/-

未报告

CD15

+/-

+/-

未报告

血型糖蛋白A

血小板GP

  急性髓细胞白血病的遗传学和分子生物学检验

  M2b:t(8;21)(q22;q22)

  M3:t(15;17)(q22;q12)

  M4Eo:inv(16)(p13;q22)

  急性淋巴细胞白血病(ALL)主要知识点:

  未分化淋巴细胞增殖。易伴发中枢神经系统白血病。

  骨髓增生极度或明显活跃,以原始和幼稚淋巴细胞为主。

  篮细胞(涂抹细胞)多见。

  FAB分类:L1、L2、L3三种亚型。

  化学染色:POX阴性;PAS阳性;ACP:T细胞阳性,B细胞阴性。

  免疫表型:T细胞:CD7、CyCD3

  B细胞:CD19、CyCD22(早期)

  成熟B细胞:SmIg

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