红细胞膜缺陷的检验及其应用

　　要点30：

　　红细胞膜的结构与功能

　　1)红细胞膜的组成与结构：红细胞膜含脂类40%，蛋白质50%，碳水化合物10%。膜的主要蛋白有主体蛋白和外周蛋白。后者包括收缩蛋白、肌动蛋白、锚蛋白和区带(4.1～4.5)等，即骨架系统，起支架作用，对维持红细胞的形状、稳定性和变形性有重要作用。膜的主要脂类为磷脂和胆固醇，起屏障和保持内环境稳定性作用。

　　2)红细胞膜的功能：屏障作用和可变性;半透性;免疫性;受体特性：激素类受体、递质类受体、丙种球蛋白受体、病毒受体、EPO受体和铁蛋白受体等。

　　要点31：

　　红细胞膜缺陷的检验

　　1)红细胞渗透脆性试验：

　　①原理：检测红细胞对不同浓度低渗盐溶液的抵抗力。红细胞在低渗盐溶液中，当水渗透其内部达一定程度时，红细胞发生膨胀破裂。根据不同浓度的低渗盐溶液中，红细胞溶血的情况，通过红细胞表面积与容积的比值，反映其对低渗盐溶液的抵抗性。比值愈小，红细胞抵抗力愈小，渗透脆性增加。反之抵抗力增大。

　　②参考值：开始溶血0.44%～0.42%(NaCl液)，完全溶血0.34%～0.32%(NaCl液)。

　　③临床意义：脆性增高见于遗传性球形细胞增多症、椭圆形细胞增多症等;降低于阻塞性黄疸、珠蛋白生成障碍性贫血、缺铁性贫血等。

　　2)自身溶血试验及其纠正试验：

　　①原理：红细胞在37℃孵育48h，其间由于膜异常引起钠内流倾向明显增加，ATP消耗过多;或糖酵解途径酶缺乏所引起ATP生成不足等原因可导致溶血，称为自身溶血试验。在孵育时，加入葡萄糖或ATP作为纠正物，观察溶血可否有一定的纠正，称为纠正试验。

　　②参考值：48h内不加纠正物的溶血度小于4.0%，加葡萄糖溶血度为小于0.6%，加ATP的溶血度小于0.8%。

　　③临床意义：膜缺陷患者溶血度增加，加纠正物可被纠正;G6PD缺陷症者溶血度轻度增加，能被葡萄糖纠正;自身免疫性溶贫溶血度轻度增加，加葡萄糖无预示价值;PNH本试验常正常。

　　3)酸化甘油溶血试验：

　　①原理：当甘油存在于低渗溶液氯化钠磷酸缓冲液时，可阻止其中的水快速进入红细胞内，使溶血过程缓慢。但甘油与膜脂质又有亲和性，可使膜脂质减少。当红细胞膜蛋白及膜脂质有缺陷时，它们在PH6.85甘油缓冲液中比正常红细胞溶解速度快，导致红细胞悬液的吸光度降至50%的时间(AGLT50)明显缩短。

　　参考值： AGLT50大于290s(30min)

　　(2)临床意义：

　　减少见于遗传性球形细胞增多症(25～150s)、肾功能衰竭、慢性白血病、自身免疫性溶贫和妊娠妇女。

　　4)蔗糖溶血试验：为PNH简易重要的筛查试验。

　　①原理：根据PNH患者的红细胞在低离子强度的蔗糖溶液中对补体敏感性增强，经孵育，补体与红细胞膜结合加强，蔗糖溶液进入红细胞内，导致渗透性溶血而设计的。

　　②参考值：定性试验：正常为阴性;定量试验：正常溶血率<5%。

　　③临床意义：PNH患者为阳性或溶血率增加，可作为PNH的筛选试验。自免溶贫有的可为阳性，白血病、骨髓硬化时可出现假阳性。

　　5)酸化血清溶血试验：

　　①原理：PNH患者体内存在对补体敏感的红细胞。酸化血清溶血试验，也称Ham试验，即红细胞在酸性(pH6.4～6.5)的正常血清中孵育，补体被激活，PNH红细胞破坏而产生溶血。而正常红细胞不被溶解，无溶血现象。正常结果为阴性。

　　②临床意义：是PNH的确诊试验。阳性主要见于PNH，某些自身免疫性溶血性贫血发作严重时可呈阳性。