要点2：

　　碱性磷酸酶染色(NAP)

　　(1)原理(偶氮偶联法)

　　血细胞内的碱性磷酸酶在pH9.4～9.6的条件下将基质液中的α-磷酸萘酚钠水解，产生α-萘酚与重氮盐偶联形成不溶性灰黑色沉淀，定位于酶活性所在之处。

　　(2)结果判断

　　阳性结果为胞质内出现灰褐色至深黑色颗粒状或片状沉淀①(-)，灰褐色沉淀，为0分。②(+)，胞质出现灰褐色沉淀，为1分。③(++)，胞质深褐色沉淀，为2分。④(+++)，胞质中已基本充满棕黑色颗粒状沉淀，但密度较低，为3分。⑤(++++)，胞质全被深黑色团块沉淀所充满，密度高，甚至遮盖胞核，为4分。

　　碱性磷酸酶染色(NAP)模式图

　　(3)正常血细胞的染色反应

　　1)碱性磷酸酶主要存在于成熟中性粒细胞，除巨噬细胞可呈阳性反应外，其他血细胞均呈阴性反应。

　　2)成熟中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)积分值的计算：在油镜下，计数100个成熟中性粒细胞(包括中性分叶核粒细胞和中性杆状核粒细胞)。分别记录其分级情况，全部阳性反应的细胞之和即为阳性率，将所有阳性反应细胞均以“+”级表示后，计算其总积分值。

　　例：某患者计数100个成熟中性粒细胞，其结果如下表：

　　(4)参考值：成熟中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)的积分值为30～130。由于各实验室的实验条件不同，正常值也有差异，应建立本实验室的正常值。这里的正常值仅供参考。

　　②血液病：慢性粒细胞白血病的NAP积分值明显减低，常为“0”，缓解时NAP积分值上升到正常。类白血病反应时的NAP积分值明显增高，中性杆状核粒细胞的碱性磷酸酶活性增强，甚至中性晚幼粒细胞也呈阳性反应。因此本法常用来鉴别慢粒和类白血病反应及观察慢粒疗效的指标之一。

　　急性粒细胞白血病时NAP积分值减低，急性淋巴细胞白血病时NAP积分值一般增高，因此本法可作为鉴别急粒和急淋的方法之一;急性单核细胞白血病时NAP积分值一般减低，有时可正常;粒细胞白血病合并细菌性感染时NAP积分值可增高，但不如单纯细菌性感染增高的明显;再生障碍性贫血的NAP积分值增高，当病情好转时，NAP积分值可下降，完全缓解时NAP活性可恢复到正常，因此本法对再障的诊断、疗效观察和估计病情均有一定意义。

　　阵发性睡眠性血红蛋白尿的NAP积分值减低，因此本法可作为鉴别阵发性睡眠性血红蛋白尿和再生障碍性贫血的方法之一;红细胞增多症的NAP积分值升高，而继发性红细胞增多症的NAP积分值无明显变化。因此本法可用来鉴别真性红细胞增多症和继发性红细胞增多症;骨髓增生异常综合征的NAP积分值减低。

　　③其他：红白血病的NAP积分值减低，慢性淋巴细胞白血病、骨髓纤维化、原发性血小板增多症和红血病等疾病的NAP积分值可增高;NAP积分值减低，也可见于镰形细胞性贫血、严重嗜酸粒细胞增多症、家族性低磷酸酶血症。

　　3)其他：应用肾上腺皮质激素、雌激素和ACTH后NAP积分值增高。