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2017年公共卫生执业医师《医学微生物学》考点解析:第九章病原性球菌

来源 :中华考试网 2017-01-12

  第九章 病原性球菌

  一、葡萄球菌属

  1.生物学特性

  (1)形态染色:球形或略呈椭圆形,典型的葡萄球菌排列成葡萄串状,无鞭毛,无芽胞,革兰染色为阳性。

  (2)培养特性:营养要求不高,在普通基础培养基上生长良好,兼性厌氧或需氧,最适生长温度为37℃,最适pH值为7.4,与普通平板上可形成圆形、隆起、表面光滑、湿润、边缘整齐、不透明的菌落,菌落因菌种不同而呈现金黄色、白色或柠檬色,色素为脂溶性。血平板上,致病菌株可形成β溶血现象。

  (3)生化反应:触酶阳性,多数菌株能够分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖,产酸不产气,致病菌株能分解甘露醇。

  (4)抗原结构:主要有葡萄球菌A蛋白(SPA),荚膜抗原及多糖抗原。

  (5)抵抗力:在无芽胞的细菌中抵抗力最强。对青霉素等抗生素敏感。但是耐药菌株逐年增多,已成为医院内感染最常见的致病菌。

  (6)分类:根据色素、生化反应等表型的不同,葡萄球菌可分为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌3种。

  2.临床特征

  (1)致病物质:凝固酶、耐热核酸酶等。凝固酶是鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标。毒素包括葡萄球菌溶素,杀白细胞素,肠毒素,表皮剥脱毒素,毒性休克综合征毒素-1(TSST-1)。

  (2)所致疾病:有侵袭性和毒素性两种类型。

  侵袭性疾病主要引起化脓性炎症,是葡萄球菌引起的最常见感染。如局部感染的疖、痈、毛囊炎等皮肤及肺炎等内脏器官感染;全身感染的败血症、脓毒血症等。

  毒素性疾病由葡萄球菌产生的有关外毒素引起,主要有①食物中毒②假膜性肠炎③烫伤样皮肤综合征④毒性休克综合征。

  (3)免疫性:人类对葡萄球菌有一定的天然免疫力。病愈后免疫力不牢固。

  3.微生物检验

  (1)标本采集:不同病型采集不同标本。化脓性病灶采集脓汁、渗出液;疑为败血症采集血液;脑膜炎采集脑脊液;食物中毒采集病人呕吐物、可疑食物和粪便等,采集时避免病灶周围正常菌群污染。

  (2)检验程序及方法:

  1)直接涂片镜检:无菌体液标本经染色直接显微镜镜检后,发现有革兰阳性球菌,可做出“查见类似葡萄球菌属革兰阳性球菌”的初步报告。

  2)分离培养和鉴定:不同标本经处理后接种血琼脂平板。经37℃孵育18~24h,观察菌落形态,致病葡萄球菌有β溶血现象。挑选可疑菌落进一步作形态、生化等方面的鉴定。鉴定试验方法及要点如下:

  ①血浆凝固酶试验,鉴定致病性葡萄球菌;

  ②耐热核酸酶试验,用于检测金黄色葡萄球菌产生的耐热核酸酶;

  ③甘露醇发酵试验,金黄色葡萄球菌可发酵甘露醇,该试验为阳性;

  ④SPA的检测,是鉴定金黄色葡萄球菌的指标之一;

  ⑤触酶试验,葡萄球菌该试验阴性,以区别于链球菌;

  ⑥肠毒素的测定,将食物中毒病人的呕吐物或剩余物接种于肉汤管中,孵育后取上清液注射至6~8周龄的幼猫腹腔,若于4h内发生呕吐、腹泻、体温升高、死亡等现象,提示有肠毒素存在。

  二、链球菌属

  1.生物学性状

  (1)形态与染色:球形或椭圆形,其中链球菌呈链状排列,革兰染色阳性,无鞭毛,无芽胞。

  (2)培养特性:营养要求较高,在血琼脂平板上可形成灰白色、圆形细小菌落,不同群链球菌可出现不同溶血现象,即β溶血环,α溶血环及不溶血。

  (3)生化反应:触酶阴性,一般不分解菊糖,不被胆汁溶解,这两个特性可用来鉴别甲型溶血性链球菌和肺炎链球菌。

  (4)抗原结构:主要有蛋白质抗原,多糖抗原,核蛋白抗原。其中M蛋白抗原与致病性有关,多糖抗原又称为C抗原,根据C抗原不同,将链球菌分为20个群,核蛋白抗原无特异性。

  (5)分类:按链球菌细胞壁中多糖抗原的不同,将其分为20个血清群(A~H,K~V),对人致病的链球菌约90%属于A群,即化脓性链球菌。

  (6)抵抗力:不强,对常用消毒剂抗菌药物均敏感。青霉素为首选治疗药物,极少发现耐青霉素的菌株。

  2.临床特征

  (1)致病物质:A群链球菌致病力最强,有较强的侵袭力,是最常见的致病性链球菌。主要有①链球菌溶血素:分为链球菌溶血素O(SLO)和链球菌溶血素S(SLS)两种。②致热外毒素。③侵袭性物质:主要包括脂磷壁酸、纤维黏连蛋白结合蛋白、M蛋白等黏附素以及透明质酸酶、链激酶、链道酶等侵袭性酶。

  (2)所致疾病及临床表现:A群链球菌引起的疾病约占人类链球菌感染的90%,可引起化脓性、中毒性和超敏反应性三类疾病。①化脓性炎症②猩红热③链球菌性超敏反应性疾病。

  (3)免疫性:人体感染链球菌后血清中可出现多种抗体,但因链球菌的型别多,各型间无交叉免疫力,故常反复感染。

  3.微生物检验

  (1)标本采集:根据不同疾病的特点取不同标本。

  (2)检验程序及方法:

  1)直接涂片镜检:无污染标本经直接涂片革兰染色后镜检,发现有典型的链状排列革兰阳性球菌时,可初步报告。

  2)分离培养和鉴定:采用血琼脂平板培养有助于识别链球菌的溶血特性和鉴定,在5%C02环境下,经37℃孵育24h,观察菌落性状,取可疑菌落做进一步鉴定。主要鉴定试验方法及要点如下:

  ①杆菌肽试验敏感试验,出现抑菌环者即可初步鉴定为A群链球菌。

  ②Optochin敏感试验,抑菌环~14mm为敏感,肺炎链球菌抑菌环为敏感,其他链球菌不出现或抑菌环<14mm,本试验较胆盐溶菌试验鉴别价值更可靠。

  ③胆盐溶菌试验,肺炎链球菌阳性,草绿色链球菌阴性。

  ④血清学鉴定试验,目前应用较普遍的是商品化试剂盒——STREPTEX,它主要用于检测链球菌群的特异性抗原,出现凝集者为阳性。

  ⑤抗SLO试验,常用于风湿性关节炎、急性肾小球肾炎的辅助诊断。

  三、肺炎链球菌

  1.生物学特性:为革兰阳性球菌,呈矛尖状,成双排列,有荚膜,无鞭毛,无芽胞。营养要求较高,兼性厌氧菌,可形成中心下陷的脐窝状的菌落,有自溶现象。可分解多种糖类,产酸不产气,多数菌株分解菊糖,胆汁溶解试验阳性,Optochin敏感试验阳性,可作为肺炎链球菌与草绿色链球菌的鉴别。其抗原成分包括荚膜多糖,菌体多糖,M蛋白。抵抗力弱,有荚膜的抵抗力强,对一般消毒剂敏感。对青霉素、红霉素敏感。

  2.临床特征:肺炎链球菌是一种条件致病菌,可以引起大叶性肺炎,其次是支气管炎,可继发胸膜炎、脓胸,还可引起中耳炎、乳突炎和脑膜炎。

  3.微生物检验

  (1)标本的采集:根据病种采集不同的标本。

  (2)检验程序及方法:

  1)直接涂片检查,除血液标本,其他标本均可做直接涂片检查。如见革兰阳性矛尖状双球菌,周围有较宽的透明区,经荚膜染色确认后可初诊,并报告“找到肺炎链球菌”。

  2)分离培养,血液、脑脊液增菌培养后,呈均匀浑浊,且有绿色荧光。血液、脑脊液增菌后,脓汁或痰标本直接接种于血琼脂,置5%~10%CO2环境中培养后观察菌落,并取可疑菌落做进一步菊糖发酵实训,胆盐溶菌试验和Optochin敏感试验。

  3)动物实训,小白鼠对肺炎链球菌极为敏感,通常在接种后12~36h,因败血症而死亡。

  4)荚膜肿胀试验:将接种待检菌的小白鼠腹腔液置于玻片上,混入不稀释的抗荚膜抗原的免疫血清,加少量碱性美蓝染色液后,覆盖玻片,用油镜检查,如发现荚膜出现肿胀为阳性。

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