四、肠球菌属

　　1.生物学特性：肠球菌为G+，呈单个、成双或短链状排列，无芽胞，无荚膜，营养要求较高，在血平板上可形成灰白色、不透明、表面光滑、圆形菌落，并伴有α或不溶血现象。能在高盐、高碱条件(pH9.6)，高胆汁(40%)培养基上和10～45~C的环境下生长。触酶阴性，胆汁七叶苷水解、万古霉素敏感性及吡咯烷基芳基酰胺酶均为阳性。

　　2.临床特征：肠球菌所致的感染中最常见为尿路感染，而其中绝大部分为院内感染，亦是引起老年人和严重基础疾病患者败血症的常见病原菌。近年来肠球菌耐药菌株及其所致的感染率增加。

　　3.微生物检验

　　(1)标本的采集：根据病种的不同，可采集尿液、血液及脓性分泌物等标本。

　　(2)检验程序及方法：

　　1)直接涂片：可见单个、成双或短链状排列的卵圆形革兰阳性球菌。

　　2)分离培养：用血平板或选择性培养基，如叠氮胆汁七叶苷琼脂进行分离培养，该培养基可抑制革兰阴性杆菌的生长，而长出的肠球菌菌落为黑色，便于识别。

　　3)鉴定：主要试验有

　　①PYR试验。本法是一种快速筛选鉴定试验。用于鉴定能产生吡咯烷基芳基酰胺酶的细菌，如肠球菌、链球菌属中的化脓性链球菌、草绿色气球菌和某些凝固酶阴性葡萄球菌等。

　　②胆汁一七叶苷试验。D群链球菌和肠球菌能在含有胆盐的培养基中水解七叶苷，其生成物与铁离子反应生成黑色化合物，97%的肠球菌在24h培养后呈阳性反应，72h后100%为阳性。但本法不能区别肠球菌和非肠球菌，进一步鉴定需做盐耐受试验。

　　③盐耐受试验。肠球菌能在含6.5%NaCl的心浸液肉汤中生长，本法结合胆汁-七叶苷试验可鉴定肠球菌。

　　五、奈瑟菌属

　　1.脑膜炎奈瑟菌

　　(1)生物学特性

　　①形态与染色：为革兰阴性双球菌，菌体呈肾形，成对排列，新分离的菌株有荚膜和菌毛，无芽胞，无鞭毛。

　　②培养特性：营养要求高，最适温度为37~C，最适pH为7.4～7.6。在巧克力平板上菌落为蓝灰色、半透明、光滑、湿润、扁平、边缘整齐呈露滴状;在血平板上菌落不溶血，无色素;卵黄双抗(EPV)培养基菌落为无色，较大且光滑、湿润、扁平，边缘整齐等。

　　③生化反应：绝大多数菌株能分解葡萄糖和麦芽糖，产酸不产气(因淋病奈瑟菌不分解麦芽糖，借此与之鉴别)。

　　④抗原及分型：根据群特异性荚膜多糖抗原不同，将该菌分为13个血清群，其中H、I、K血清群是由我国发现的，我国流行的菌株以A群为主。

　　⑤抵抗力：抵抗力弱，对干燥、热、寒冷、紫外线、消毒剂等均十分敏感。对磺胺类、青霉素、链霉素均很敏感。

　　(2)临床特征

　　①致病物质：主要有内毒素、荚膜和菌毛。

　　②所致疾病及临床表现：本菌主要引起流行性脑脊髓膜炎，传染源是病人和带菌者，经飞沫传播，主要临床症状为脑膜刺激征，严重者可死亡，病死率极高。

　　③免疫性：病后可产生群特异性抗体，但不持久。

　　(3)微生物检验

　　1)标本采集：根据临床病程采集不同标本。采集的标本应立即送检或用血平板进行床旁接种后立即孵育。

　　2)检验程序及方法：

　　①直接涂片检查：取脑脊液离心后沉淀物涂片或刺破瘀斑血印片，干燥固定后革兰染色或美蓝染色镜检，若发现中性粒细胞内(或胞外)革兰阴性双球菌，呈肾形成对排列，可初步报告。

　　②分离培养：增菌后接种于巧克力琼脂或EPV琼脂，置5%～10%CO2环境中培养后观察菌落，取可疑菌落涂片，并进一步根据相应的生化反应等试验予以鉴定。

　　③鉴定：通过直接凝集试验鉴定血清型别，及氧化酶、糖类发酵和触酶试验等生化反应作出鉴定。总之，如直接镜检形态为革兰染色阴性双球菌时可初步报告，经分离培养后见菌落特征典型、分解葡萄糖、麦芽糖、产生少量酸，氧化酶试验阳性、血清凝集试验阳性，即可报告“检出脑膜炎奈瑟菌”。

　　2.淋病奈瑟菌

　　(1)生物学特性：本菌的形态常呈球形或肾形，成对排列，形似咖啡豆，革兰阴性。新分离的菌株可有荚膜和菌毛，无芽胞和鞭毛。需氧生长，营养要求较高，只能在巧克力琼脂培养基中生长，初次分离时须在5%～10%CO2环境下培养，可形成灰白色的菌落。本菌只分解葡萄糖，产酸不产气，氧化酶和触酶试验阳性。抵抗力弱，对消毒剂敏感，对青霉素、磺胺等抗生素敏感，但是耐药菌株逐渐增多。

　　(2)临床特征：致病物质有菌毛、外膜蛋白、IgAl蛋白水解酶、LPS等，主要引起人类淋病，是我国目前流行的发病率最高的性病，主要通过性接触而感染泌尿生殖道、口咽部和肛门直肠的黏膜，并可播散至全身。若母亲患有淋病时，婴儿出生时可感染导致淋菌性结膜炎。病后虽产生相应的细胞免疫和体液免疫，但免疫力弱，不足以保护再感染。

　　(3)微生物检验

　　1)标本采集：主要取泌尿生殖道脓性分泌物或眼结膜分泌物，全身淋病可取血液，采集后立即送检。

　　2)检验程序及方法：

　　①直接涂片检查：革兰染色后镜检若发现中性粒细胞内有革兰阴性双球菌，结合症状可初诊。

　　②分离培养：细菌培养仍是目前世界卫生组织推荐的筛选淋病病人的惟一方法。常用的分离培养基为巧克力平板。接种后置于5%～10%CO。环境中培养后观察菌落，取可疑菌落进行涂片镜检，并作生化试验予以鉴定。

　　例题：

　　1.SPA 存在于：

　　A.所有的葡萄球菌表面

　　B.化脓性球菌表面

　　C.90%以上金黄色葡萄球菌表面

　　D.表皮葡萄球菌表面

　　E.产肠毒素的葡萄球菌表面

　　2.鉴定葡萄球菌致病性的重要指标是：

　　A.产生溶素

　　B.产生血浆凝固酶

　　C.产生色素

　　D.具有 SPA

　　E.发酵葡萄糖

　　3.关于 SPA，下列哪一项是错误的?

　　A.为金黄色葡萄球菌表面的蛋白质抗原

　　B.为所有的葡萄球菌都具有的一种结构

　　C.能与人类 IgG 的 Fc 段结合

　　D.具有抗吞噬作用

　　E.与协同凝集相关

　　参考答案

　　1.C 2.B 3.B