一、标本采集

　　（一）标本采集

　　采集标本前应禁欲3～5d ，采前排净尿液;将一次射出的全部精液直接排入洁净、干燥的容器内(不能用乳胶避孕套 )。采集微生物培养标本须无菌操作。

　　（二）标本运送

　　精液采集后应立即保温送检（＜1h） 。温度低于20℃或高于40℃影响精子活动。

　　(三)标本采集次数 一般应间隔1～2周 检查一次，连续检查2～3次 。

　　二、理学检查

　　（一）精液外观和气味

　　1.正常　刚射出的精液一般为微混浊的灰白色，有一股腥味，自行液化后为半透明的乳白色。

　　2.异常

　　(1)红色：前列腺和精囊腺炎症、结核、肿瘤或结石等。

　　(2)黄色：前列腺炎、精囊炎等。

　　（二）精液量

　　1.方法　通常用规格为10ml刻度吸管测定精液全量。

　　2.正常　一次排精量为2～6ml

　　(主管/师-2～6ml;士-1.5～6ml)，平均3.5ml。

　　3.异常　精液量少于1.5ml (主管/师-1ml，士-1.5ml)

　　或大于6ml (主管/师-8ml;士-6ml)，为异常，不利于生育。

　　前列腺炎时，可引起蛋白酶缺乏，导致液化时间延长，甚至不液化，抑制精子活动力，从而减少受孕机会。

　　（四）精液黏稠度

　　系指完全液化后的精液黏度。

　　检测方法

　　1.直接玻棒法： 将玻棒插入精液标本，提棒时可拉起黏丝，正常精液黏丝长度不超过2cm 。黏稠度增加时，精液悬滴可形成长于2cm的长丝。

　　2.黏度计法： 测定0.5ml精液通过黏度计所需的时间即为精液黏稠度。

　　3.临床意义

　　(1)黏稠度增加：精液常伴不液化，影响精子活力。

　　(2)黏稠度下降：见于先天性无精囊腺及精子浓度太低或无精子症。

　　（五）精液酸碱度（pH）

　　1.检测方法

　　用精密pH试纸或酸度计测定，应在射精后1h内完成。

　　2.临床意义

　　正常精液pH为7.2～7.8 。

　　(1)pH值＜7.0 ，伴少精症，常反映输精管道阻塞、先天性精囊缺如或附睾病变。

　　(2)pH值＞8.0 (主管：pH>8.0;师/士：pH>7.8)，常见于急性前列腺炎、精囊炎或附睾炎。

　　三、化学检査

　　（一）精浆果糖测定

　　1.测定方法及评价

　　①间苯二酚比色法(国内常用)：9.11～17.67mmol/L;

　　②吲哚显色法：每次射精≥13μmol/1次射精，本法为WHO推荐方法。

　　2.临床意义

　　①先天性精囊 腺缺如，果糖为阴性。

　　②精囊腺炎时，果糖含量减低。

　　③在无精症和射精量少于1ml者，若精浆中无果糖为精囊阻塞;有果糖，则为射精管阻塞。

　　（二）精浆α-葡糖苷酶测定

　　1.测定方法及评价

　　比色法可测定精浆中α-葡糖苷酶的活性。葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖的生成量，反映α-葡糖苷酶的活性。国内临床上较为常用。

　　2.临床意义

　　α-葡糖苷酶活性下降，见于阻塞性无精子症，具有肯定性诊断价值。

　　（三）精浆乳酸脱氢酶同工酶X（LD-X）测定

　　1.测定方法及评价

　　LD-X的电泳位置在LD3-LD4之间。活性测定多采用聚丙烯酰胺凝胶电泳、酶联染色及光度计扫描法，求得其相对百分率。国内临床上较为常用。

　　2.参考值 　LD-X相对活性≥42.6%。

　　3.临床意义

　　精子 发生缺陷时无LD-X形成。少精或无精者可致LD-X活性减低。

　　（四）精浆酸性磷酸酶测定（ACP）

　　1.参考值

　　80～1000U/ml(速率法);>200U/1次射精

　　(β-硝基酚法)。

　　2.临床意义

　　前列腺炎时ACP活性减低； 前列腺癌和前列腺肥大时，ACP活性增高。

　　四、显微镜检查

　　（一）涂片检查

　　精液液化后，取1滴 混匀的精液置于载玻片上，通常在低倍镜 下粗略观察有无精子，是活动还是不活动。若遇无精子症 ，应将标本在600g下离心15min 后取沉淀物重复检查。

　　（二）检测指标

　　1.精子活动率 　对精子活力的定性检查

　　（1）方法： 取液化均匀的精液1滴置载玻片上，加盖玻片放置片刻，在高倍镜下观察100个精子 ，计数活动精子与不活动精子的比例即为精子的活动率。

　　（2）参考值： 正常人精液在排精30～60min内，精子活动率80%～90% ，应至少>60%。

　　2.精子存活率 　对精子存活率的观察。

　　（1）检测方法： 取液化均匀的精液1滴置载玻片上，加等量染色液(伊红Y、台盼蓝等)混匀，放置片刻，推成薄片，在高倍镜下观察计数100个精子中不着色精子与着色精子的比例，即为精子存活率。一般精子死亡后，细胞膜完整性受损，失去屏障功能，易于着色。

　　（2）参考值： 有生育力男性精子存活率应≥58% 。

　　3.精子活动力

　　指精子向前运动的能力，是直接反映精子质量的一项指标。

　　（1）检测方法： 取液化均匀精液1滴置载玻片上，盖上盖玻片，放置片刻，在高倍镜下观察5～10个视野，计数100个精子并进行活动力分级，以百分率表示。

　　（2）结果判断： WH0建议将精子活动力分为4级 ：a.快速前向运动(Ⅲ级：直线运动);b.慢或呆滞的前向运动(Ⅱ级：运动缓慢);c.非前向运动(Ⅰ级：原地运动);d.不动(0级：不活动)。

　　（3）参考值： WHO规定正常生育者精子活动力：射精后60min内，a级精子应＞25% ;或a级和b级精子的总和＞50% 。

　　（4）临床意义： 精子活动力减低，精子存活率减低，0级、Ⅰ级精子40%以上，见于精索静脉曲张、泌尿生殖系感染如前列腺炎等及使用某些药物如抗疟药、雌激素等。

　　（三）精子计数

　　指单位体积中精子数，即精子浓度。精子计数乘以1次射精量，即1次射精精子总数。

　　测定方法及评价：

　　1.粗略估计法： 取液化均匀的精液1滴置载玻片上，盖上盖玻片，放置片刻，在高倍镜下观察5个视野，取每个视野的精子平均数×109，即为大概精子数。该法操作简便，但只能作粗略估计。

　　2.精确计数法：

　　①血细胞计数板计数：只能用于精子数量观察，不能同时进行精子活动率和活动度、运动轨迹和速度的检查等。

　　②Makler精子计数板：简便、快速，精液不需要稀释，一次加样不但可计数精子密度，还可分析精子的活动力和活动率。

　　③计算机辅助精液分析(CASA)：CASA系统是利用图像和计算机视屏技术来进行精子计数，利用CASA计数精子简单、快速，但易受精液中细胞成分和非精子颗粒物质的影响。

　　3.参考值

　　精子总数≥39×106/次

　　精子浓度≥15×109/L

　　4.临床意义

　　精子数量减低可见于：①精索静脉曲张;②先天性或后天性睾丸疾病，如睾丸畸形、萎缩、结核、淋病、炎症等;③输精管或精囊缺如;④重金属损害，如铅、镉中毒或放射性损害;⑤某些药物，如抗癌药等或长期服用棉酚;⑥50岁以上男性精子数逐年减少。

　　（四）精子形态检查

　　1.正常形态： 正常精子形似蝌蚪状，由头、体(颈、中段)、尾三部分构成。头部正面呈卵圆形，侧面呈扁平梨形;体部轮廓直而规则，长约5～7μm，宽1μm;尾部细长，一般长约50～60μm。

　　2.异常形态： ①头部异常：包括大头、小头、锥形头、梨形头、无定形头等;②体部异常：主要指肿胀和不规则;③尾部异常：包括短尾、多尾、发夹状尾及断尾等。

　　正常及异常形态精子模式图

　　3.临床意义

　　正常精液中异常精子应＜20% ，超过40%，即影响精液质量，超过50%常可导致不育 。感染、外伤、高温、放射线、酒精中毒、药物和精索静脉曲张均可使畸形精子数量增加。

　　（五）其他细胞

　　1.未成熟生殖细胞

　　参考值：未成熟生精细胞<1%。

　　临床意义：曲细精管受损(如药物或其他因素)，精液中可出现较多的未成熟生精细胞。

　　正常人成熟精细胞>99%，在病理状况下，当曲细精管受损(如药物或其他因素)，精液中可出现较多的未成熟生精细胞。

　　2.红细胞、白细胞、上皮细胞

　　(1)红细胞(偶见)和白细胞：正常＜5/HP 。在生殖道炎症、结核、恶性肿瘤时，精液中红、白细胞数可增高。

　　(2)上皮细胞：正常偶尔可见前列腺上皮细胞，增多见于前列腺增生。

　　3.癌细胞

　　精液中查见癌细胞对生殖系恶性肿瘤的诊断将提供重要依据。

　　五、免疫学检查

　　抗精子抗体检查方法

　　1.混合抗免疫球蛋白试验(MAR)

　　2.免疫珠试验

　　3.精子凝集试验(SAT)

　　六、微生物学检查

　　七、精子功能检查 精子低渗肿胀试验（HOS）

　　1.检查方法

　　将精子置入低渗溶液中，计算100～200个精子中出现肿胀的百分率。结果判断：a、b、c、d、e及f型(部分尾部肿胀);g型(全尾部肿胀)。

　　2.参考值　g型肿胀精子率>50%。

　　3.临床意义　精子尾部低渗肿胀试验可作为体外精子膜功能及完整性的评估指标，预测精子潜在的受精能力。有研究表明，不育症的精子尾部肿胀率明显减低。

　　精液参考值

　　精液量：2～6ml;颜色：灰白色;液化时间：<60min;

　　黏稠度：拉丝<2cm;pH7.2～8.0;活动率：80%～90%;

　　活动力：a>25%, a+b>50%;存活率≥58%;

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