脑脊液细胞计数

　　【准备】

　　1.个人准备 穿好工作服，戴好口罩、帽子。

　　2.物品准备 查看实验所需器材、试剂是否齐全，如不全，应及时向工作人员提出。

　　3.本实验所需器材、试剂、试管、微量吸管、棉球、Neubauer计数板、盖玻片、滴管、计时器、显微镜、冰醋酸。

　　【操作】

　　(一)细胞总数计数

　　1.充分混匀脑脊液标本

　　2.用微量吸管吸取混匀的脑脊液，冲入血细胞计数板的上下2个计数池。

　　3.静置2～3min。

　　4.低倍镜下计数两个计数池内四角和中央大方格共10个大方格内的细胞数。

　　5.计算：细胞总数/L=N×106/L (N表示10个大方格内的细胞总数)

　　(二)白细胞计数

　　1.出去红细胞：在小试管内加入冰乙酸1～2滴，转动试管，使内壁黏附有少量冰乙酸后倾去。

　　2.滴加混匀的脑脊液3～4滴，混匀，静置5min，使红细胞破坏。

　　3.充池：充分混匀。

　　4.用微量吸管吸取混匀后的稀释脑脊液充入2个计数池。

　　5.计数：静置2～3min待细胞沉降后。

　　6.低倍镜下计数两个计数池内四角和中央大方格共10个大方格内的细胞数。

　　7.计算：白细胞总数/L=N×106/L (N表示10个大方格内的白细胞总数)

　　【操作后】

　　1.关闭显微镜电源。

　　2.将使用过的一次性器材，剩余标本置于污物桶中。

　　【注意事项】

　　1.应准确控制离心力及离心时间。

　　2.充池时需充分混匀标本。充池应一次完成，不可充液过多、过少或有气泡产生。充池后不能移动盖玻片。