骨髓涂片铁染色

　　【准备】

　　1.个人准备 穿好工作服，戴好口罩、帽子。

　　2.物品准备 查看实验所需器材、试剂是否齐全，如不全，应及时向工作人员提出。

　　3.本实验所需器材试剂：滴管、染缸、水浴箱、显微镜、擦镜纸、计时器、酸性亚铁氰化钾、甲醇固定液、蒸馏水、核固红染液复染液、乙醚。

　　【操作】

　　1.干燥骨髓涂片用甲醇固定10min。待干。

　　2.玻片上滴满酸性亚铁氰化钾，37℃染色30min。

　　3.用蒸馏水冲洗后。

　　4.用核固红染液复燃10～15min。

　　5.流水冲洗.

　　6.待干，镜检。

　　7.判断细胞外铁含量(细胞外铁：(-)：无颗粒;(+)：有少量铁颗粒获偶见铁小珠;(++)：有较多的铁颗粒或小珠;(+++)：有很多的铁颗粒 小珠或小块状。(++++)：有极多铁颗粒小珠，并有很多的小块，密集成堆)。

　　8.判断细胞内铁含量(细胞内铁：用油镜计数100个中晚幼红细胞，记录胞质中含有蓝色铁颗粒的细胞(记录铁粒幼细胞)的百分率)。

　　【操作后】

　　1.用滴有乙醚的擦镜纸擦拭油镜镜头。

　　2.关闭显微镜电源。

　　3.将使用过的一次性器材，剩余标本置于污物桶中。

　　【注意事项】

　　1.所用器材必须清洁，无铁污染。

　　2.骨髓取材要满意，外铁一定要有骨髓碎块或颗粒，取材不佳时，往往影响结果。

　　3.酸性亚铁氰化钾溶液须新鲜配制。

　　4.应准确控制固定及染色时间。

　　5.细胞内铁计数以中、晚幼红细胞为准。