四、填空题(每空0.5分)

　　1.通过自动获取或人为地供给外源______，使细胞或培养的受体细胞获得新的______，这就是转化作用。【DNA;遗传表型】

　　2.由__________和__________介导的基因移位或重排，称为转座。【插入序列;转座子】

　　3.一个完整的基因克隆过程应包括：目的基因的获取，______的选择与改造，_________和__________连接为重组DNA，重组DNA分子导入_________，筛选出含感兴趣基因的重组DNA转化细胞。【克隆载体;目的基因;载体DNA;受体细胞】

　　4.限制性核酸内切酶是一类识别并水解_________________的核酸___________酶。

　　【双链DNA特异序列;内切】

　　5.科学家感兴趣的外源基因又称___________，其来源有几种途径：化学合成，酶促合成cDNA，制备的基因组DNA及_________技术。【目的基因;PCR】

　　6.外源DNA离开染色体是不能复制的。将_______与______连接，构建成重组DNA分子，外源DNA则可被复制。 【外源基因;载体DNA】

　　7.根据克隆载体性质不同，将重组DNA分子导人细菌的方法有_______、________及感染。【转化;转染】

　　五、名词解释题(每小题2分)

　　1.质粒 【是存在于细菌染色体外的小型环状双链DNA分子。质粒分子本身是含有复制功能的遗传结构，能在宿主细胞独立自主地进行复制，并在细胞分裂时恒定地传给子代细胞。质粒带有某些遗传信息，所以会赋予宿主细胞一些遗传性状。因为质粒DNA有自我复制功能及所携带的遗传信息等特性，故可作为重组DNA操作的载体。】

　　2.限制性核酸内切酶 【就是识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类核酸内切酶。限制性核酸内切酶存在于细菌体内，与相伴存在的甲基化酶共同构成细菌的限制——修饰体系，限制外源DNA、保护自身DNA，对细菌遗传性状的稳定遗传具有重要意义。限制性核酸内切酶分为三类。重组DNA技术中常用的限制性内切核酸酶为Ⅱ类酶。】

　　3.载体 【即基因载体，或称克隆载体，是在基因工程中为“携带”感兴趣的外源DNA、实现外源DNA的无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采用的一些DNA分子，具有自我复制和表达功能。其中，为使插入的外源DNA序列可转录,进而翻译成多肽链而特意设计的克隆载体又称表达载体。克隆载体有质粒DNA、噬菌体DNA和病毒DNA，它们经适当改造后仍具有自我复制能力，或兼有表达外源基因的能力。】

　　4.DNA克隆 【就是应用酶学的方法，在体外将各种来源的遗传物质——同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工的DNA与载体DNA结合成一个具有自我复制能力的DNA分子——复制子，继而通过转化或转染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化细胞，再进行扩增、提取获得大量同一DNA分子，即DNA克隆，又称基因克隆、重组DNA或基因工程。】

　　5.目的基因 【应用重组DNA技术有时是为分离、获得某一感兴趣的基因或DNA序列，或是为获得感兴趣基因的表达产物——蛋白质。这些感兴趣的基因或DNA序列就是目的基因，又称目的DNA。目的DNA有两种类型，即cDNA和基因组DNA。】

　　6.同源重组 【发生在同源序列间的重组称为同源重组，又称基本重组。同源重组的发生依赖两分子之间序列的相同或类似性。如果通过转化或转导获得的外源DNA与宿主DNA同源，那么外源DNA就可以通过同源重组方式整合进宿主染色体。】

　　7.cDNA文库 【以mRNA为模板，利用反转录酶合成与mRNA互补的DNA，即cDNA，再复制成双链cDNA片段，与适当载体连接后转入受体菌。不同细菌包含了不同mRNA为模板的cDNA分子或片段，这样生长的全部细菌所携带的各种cDNA分子或片段就代表了整个组织或细胞表达的各种mRNA信息，即cDNA文库。】

　　8.基因组DNA文库 【利用限制性核酸内切酶将染色体DNA切割成一定基因水平的许多片段，其中即含有人们感兴趣的基因片段。将这些片段分于与适当的克隆载体拼接成重组DNA分子，继而转入受体菌，使每个细菌内都携带一种重组DNA分子。不同细菌所包含的重组DNA分子可能为不同的染色体DNA片段，这样全部转化细菌所携带的各种染色体片段就代表了染色体的整个基因组。存在于转化细菌内、由克隆载体所携带的所有基因组DNA片段的集合称基因组DNA文库。基因组DNA文库涵盖了基因组全部基因信息。】

　　9.转座 【在基因组内有些基因可以从一个位置移动到另一位置。这些可移动的DNA序列包括插入序列和转座子。由插入序列和转座子介导的基因移位或重排现象称为转座。】