四、是非题

　　1.分子病都是遗传病。

　　2.一个蛋白质样品，在某一条件下用电泳检查，显示一条带，因此说明，该样品是纯的。

　　3.蛋白质的SDS聚丙烯酰氨凝胶电泳和圆盘电泳是两种完全不同的技术。

　　4.等电点不是蛋白质的特征参数。

　　5.在蛋白质和多肽分子中，连接氨基酸残基的共价键除肽键外，还有就是二硫键。

　　6.蛋白质在小于等电点的pH溶液中，向阳极移动，而在大于等电点的pH溶液中，将向阴极移动。

　　7.电泳和等电聚焦都是根据蛋白质的电荷不同，即酸碱性质不同的两种分离蛋白质混合物的方法。

　　8.天然存在的氨基酸就是天然氨基酸。

　　9.用纸电泳法分离氨基酸主要是根据氨基酸的极性不同。

　　10.在天然氨基酸中只限于α-NH2能与亚硝酸反应，定量放出氮气。

　　11.由于静电作用，在等电点时氨基酸溶解度最小。

　　12.氨基酸在水溶液中或在晶体状态时都以两性离子形式存在。

　　13.两性离子氨基酸在溶液中，其正负离子的解离度与溶液pH无关。

　　14.氨基酸的等电点可以由其分子上解离基团的解离常数来确定。

　　15.溶液的pH可以影响氨基酸的pI值。

　　16.天然蛋白质α-螺旋为右手螺旋。

　　17.多肽链能否形成α-螺旋及螺旋是否稳定与其氨基酸组成和排列顺序直接有关。

　　18.具有四级结构的蛋白质，当它的每个亚基单独存在时仍能保持蛋白质原有的生物活性。

　　19.渗透压法、超离心法、凝胶过滤法及聚丙烯酰胺凝胶电泳法都是利用蛋白质的物理化学性质来测定蛋白质分子量的。

　　20.蛋白质的变性是蛋白质分子立体结构被破坏，因此常涉及肽键的断裂。

　　21.当某一蛋白质分子的酸性氨基酸残基数目等于其碱性氨基酸残基数目时，此蛋白质的等电点为7.0。

　　22.一般说来，蛋白质在水溶液中，非极性氨基酸残基倾向于埋在分子的内部而不是表面。

　　23.蛋白质中一个氨基酸残基的改变，必定引起蛋白质结构的显著变化。

　　24.在每一种蛋白质多肽链中，氨基酸残基排列顺序都是一定的，而不是随机的。

　　25.蛋白质变性后溶解度降低，主要是因为电荷被中和及水膜被去除所引起的。

　　26.蛋白质变性后，其分子量变小。

　　27.蛋白质的氨基酸顺序(一级结构)在很大程度上决定它的三维构象。

　　28.蛋白质的亚基(或称亚单位)和肽链是同义词。

　　29.氨基酸的等电点是算出来的，同样蛋白质的等电点也可以算出来。

　　30.所有蛋白质都具有一级、二级、三级、四级结构。

　　31.蛋白质构象是蛋白质分子中的原子绕单键旋转而产生的蛋白质分子中的各原子的空间排布。因此，构象并不是一种可以分离的单一立体结构形式。

　　32.蛋白质中的稀有氨基酸在遗传上是特殊的，因为它们没有三联体密码，所有已知稀有氨基酸都是从其前体经化学修饰产生的。

　　33.当氨基酸处于等电点状态时，由于静电引力的作用，氨基酸的溶解度最小，容易发生沉淀。

　　34.一氨基一羧基氨基酸pI为中性，因为-COOH和-NH2解离度相同。

　　35.蛋白质分子酰胺平面中除-C=O外，其余的单键都能自由旋转。

　　36.用强酸强碱变性后的蛋白质不沉淀。

　　五、问答题

　　1.简述血红蛋白的结构?其结构与功能有什么关系?血红蛋白和氧的结合受那些因素的影响?

　　2.有一个肽段，经酸水解测定，由四个氨基酸组成。用胰蛋白酶水解成为二个片段，其中一个片段在280纳米(nm)有强的光吸收，并且Pauly反应和坂口反应都是阳性。另一个片段用CNBr作用释放出一个氨基酸与茚三酮反应呈黄色，试写出这个肽的氨基酸组成及排列顺序。

　　3.有人纯化了一个未知肽，其氨基酸组成为：Asp1，Ser1，Gly1，Ala1，Met1，Phe1和lys2，又做了一系列分析，结果如下：

　　⑴FDNB与之反应再酸水解后得DNP-Ala

　　⑵胰凝乳蛋白酶(CT)消化后，从产物中分出一个纯四肽，其组成为：Asp1，Gly1，Lys1，Met1，此四肽的FDNB反应降解产物为DNP-Gly

　　⑶胰蛋白酶(T)消化八肽后又可得到组成分别为Lys1，Ala1，Ser1及Phe1，Lys1，Gly1的两个三肽及一个二肽。此二肽被CNBr处理后游离出自由天冬氨酸。

　　请列出八肽全顺序并简示你推知的过程。

　　4.某天然九肽其组成为：Gly2，Phe2，Tyr1，Met1，Asp1，Arg1和Pro1，经胰凝乳蛋白酶(CT)水解后可分得一个五肽和一个四肽，四肽的组成为：Phe1，Tyr1，Gly1和Pro1。此九肽的CNBr处理产物再经阳离子交换树脂层析并洗脱得一个组成为Arg1，Phe1和Gly1的三肽，此九肽如经胰蛋白酶(T)水解可得Phe，如用FDNB反应后再水解测得DNP-Tyr。请写出这九肽的全顺序解析过程。

　　5.已知一个九肽的氨基酸顺序是：Ala-Pro-lys-Arg-Val-Tyr-Glu-Pro-Gly，在实验室只有氨基酸分析仪，而没有氨基酸顺序测定仪的情况下，如何使用(1)羧肽酶A或B;(2)氨肽酶;(3)2，4二硝基氟苯(FDNB);(4)胰蛋白酶;(5)胰凝乳蛋白酶，来验证上述肽段的氨基酸顺序。

　　6.比较肌红蛋白和血红蛋白的氧合曲线，并加以简单的说明。

　　7.大肠杆菌含有2000种以上的蛋白质，为了分离它所表达的一个外源基因的产物并保持它的活性，常有很大困难。但为了某种目的，请根据下列要求写出具体的方法。

　　⑴利用溶解度差别进行分离。

　　⑵利用蛋白质分子大小进行分离。

　　⑶根据不同电荷进行分离。

　　⑷以制备有该产物的抗体进行分离。

　　⑸产物的浓缩。

　　⑹纯度的鉴定。

　　8.蛋白质变性过程中，有那些现象出现?并举出三种能引起蛋白质变性的试剂。

　　9.举一个例子来说明蛋白质三级结构决定于它的氨基酸顺序?

　　10.用什么试剂可将胰岛素链间的二硫键打开与还原?如果要打开牛胰岛素核酸酶链内的二硫键，则在反应体系中还必须加入什么试剂?蛋白质变性时，为防止生成的-SH基重新被氧化，可加入什么试剂来保护?

　　11.要测定蛋白质的二硫键位置，需用什么方法?请简述之。

　　12.简述White和Anfinsen进行的牛胰核糖核酸酶(Rnase)变性和复性的经典实验。这个实验说明了什么问题?

　　13.有一条多肽链-Pro-Phe-Cys-Lys-Tyr-Val-Ala-Ser-His-，如用胰蛋白酶水解可得几条肽段?用胰凝乳蛋白酶水解呢?

　　14.简述胰岛素原的激活过程?

　　15.一个五肽，经完全水解后得到等摩尔数的Ala、Cys、Lys、Ser、Phe，用苯异硫氰酸(异硫氰酸苯酯)处理后得到PTH-Ser，用胰蛋白酶水解得一个N-末端为Cys的三肽和一个二肽，用胰凝乳蛋白酶水解此三肽得一个Ala及一个二肽，问：

　　⑴胰蛋白酶水解后得到的三肽的氨基酸组成及顺序?

　　⑵胰蛋白酶水解后得到的二肽的氨基酸组成?

　　⑶此五肽的一级结构?

　　16.试计算丙氨酸(PKα-COOH=2.34，PKα-NH3=9.69)，谷氨酸(PKα-COOH=2.19，PKα-NH3=9.67，PKR-COOH=4.25)的等电点。

　　17.把Ser、Ile、Glu、Ala的混合物在含有正丁醇、水和乙酸的溶剂系统中进行单向纸层析，请写出层析的快慢顺序。

　　18.某蛋白质多肽链有一些区段为α-螺旋构象，另一些区段为β-折叠构象，该蛋白质分子量为240Kda，多肽外形总长为5.06×10-5cm，计算多肽链中α-螺旋构象占分子长度的百分之多少?

　　19.球状蛋白质在pH7的水溶液中折叠成一定空间构象。这时通常非极性氨基酸残基侧链位于分子内部形成疏水核，极性氨基酸残基位于分子表面形成亲水面。问：

　　⑴Val、Pro、Phe、Asp、Lys、Ile和His中哪些氨基酸侧链位于分子内部?哪些氨基酸侧链位于分子外部?

　　⑵Ser、Thr、Asn和Gln虽然是极性氨基酸，但它们常常位于球状蛋白质的分子内部，为什么?

　　20.多肽链片段是在疏水环境中还是在亲水环境中更利于α-螺旋的形成?为什么?