参考答案

　　一、名词解释

　　1.在 DNA 分子中按一定的次序排列的调节基因、起动基因、操纵基因和受它控制的若干个结构基因一起被称为操纵子。

　　2.指酶的反应产物或代谢途径的末端产物对酶合成的阻遏作用。

　　3.指固定在载体上，在一定的空间范围内进行催化反应的酶。

　　4.固定在载体上，在一定的空间范围内进行生命的活动称为固定化细胞。又称为固定化活细胞、固定化增殖细胞或固定化完整细胞。

　　5.是固定在载体上，在一定的空间范围内进行新陈代谢的原生质体。

　　6.借助双功能团试剂使酶蛋白分子之间发生交联，可制成网状结构的固定化酶。此固定化法称为交联固定化技术。

　　7.通过各种方法使酶分子结构发生某些改变。从而改变酶的某些特性和功能的过程，称为酶分子修饰。

　　8.利用水溶性大分子与酶结合，使酶的空间结构发生某些精细的改变，从而改变酶的特性与功能的方法称为大分子结合修饰法。简称为大分子结合法。

　　9.是利用肽链的有限水解，使酶的空间结构发生某些精细的改变，从而改变酶的特性和功能的方法。

　　10.将肽链上的某一个氨基酸换成另一个氨基酸，则会引起酶蛋白空间构象的某些改变，从而改变酶的某些特性和功能。这种修饰方法称为氨基酸置换修饰。

　　11.蛋白质工程又被称为第二代遗传工程。是指通过改造与蛋白质相对应的基因中的碱基排列次序，或设计合成新的基因，将它克隆到寄主细胞中，通过基因表达而获得具有新的特性的蛋白质的技术过程。

　　二、填空

　　1.基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程; 2.酶、克隆、细胞和原生质体融合; 3.酶生物合成

　　的调节技术、酶的分离纯化、酶反应动力学研究技术、酶分子修饰技术、酶、细胞和原生质体固定化技

　　术; 4.诱导、酶的作用底物、酶的反应产物、酶的底物类似物; 5.产物阻遏、分解代谢物阻遏; 6.

　　环腺苷酸(cAMP) 、cAMP 、受体蛋白(CRP) 、cAMP 、cAMP 受体蛋白(CRP) 、转录、翻译; 7.竞争性抑

　　制、非竞争性抑制、反竞争性抑制; 8.Km 、v 、Km 、v 、Km 、v 、Km/v ;9. 吸附法、包埋

　　法、结合法、交联法;10.1/v 、1/[S]、1/ v 、-1/Km 、Km/ v

　　三、问答题

　　1.酶的诱导合成不是任何情况下都可进行的，而是有条件的。主要有下列三点：⑴ 基因必须完整：酶的合

　　成是在基因的控制下进行的，若基因受到破坏或变异，酶的合成将受影响。因为：① 若酶所对应的结构

　　基因改变，该酶将无法合成。② 若同一操纵子中，第一位的结构基因受破坏，则第二位及其以后的各个

　　结构基因即使完好，也无法合成相应的酶。③ 若操纵基因变异，将出现二种相反的情况：一是操纵基因

　　变异后阻抑蛋白不能与之结合，那么将不受诱导物或阻遏物的影响，酶都可以合成;二是操纵基因变异

　　后，与阻抑蛋白牢固结合，那么，就无论是否有诱导物，酶均无法合成相应的酶。④ 若调节基因变异，

　　不能合成相应的阻抑蛋白。酶的合成也不受诱导物或阻遏物的影响。只有各有关基因完整，才能在添加

　　诱导物时，有可能使酶诱导合成。⑵ 阻抑蛋白活性 当添加诱导物时，诱导物与阻抑蛋白结合，使其与

　　操纵基因分离，才能进行酶的合成。⑶ 阻遏物 在添加诱导物时，细胞所处环境中，不能有高浓度的分

　　解代谢阻遏物或其它强阻遏剂存在，否则将无法诱导。因此，只有阻遏解除后，酶才能诱导合成。

　　2.酶动力学研究主要包括：①酶反应初速度的测定;②底物浓度对酶反应速度的影响;③米氏常数 Km 和

　　最大反应速度 vmax 的测定;④温度对酶反应速度的影响;⑤酶反应活化能的测定;⑥pH 对酶反应速度

　　的影响;⑦激活剂的作用;⑧抑制剂对反应速度的影响;⑨抑制类型的确定

　　3.酶分子修饰技术不断发展，修饰方法多种多样。主要的有：①金属离子置换修饰;②大分子结合修饰;

　　③肽链有限水解修饰;④酶蛋白侧链基团修饰;⑤氨基酸置换修饰;⑥物理修饰。

　　4. 蛋白质工程主要步骤如下：⑴新蛋白质结构的设计 根据 已知蛋白质或酶的化学结构、空间结构及其特

　　性，确定欲得到的新蛋白质或酶的氨基酸排列次序，确定欲置换的氨基酸及位置。⑵突变基因的核苷酸

　　序列的确定 根据欲得到的蛋白质的氨基酸序列，确定其对应的mRNA 上的核苷酸序列。再根据互补原

　　则，从 mRNA 核苷酸序列确定其所对应的突变基因上的核苷酸序列。根据欲置换的氨基酸确定需要置换

　　的核苷酸及其位置。⑶突变基因的获得 根据欲得到的突变基因的核苷酸序列以及需要置换的核苷酸位

　　置，首先用 DNA 合成仪合成有一个或几个核苷酸被置换了的寡核苷酸。再用此寡核苷酸为引物，通过

　　定点突变(Site directed mutagenesis)技术，而获得所需的突变基因。这称之为寡核苷酸诱导的定位突变，

　　是蛋白质工程中常用的技术。⑷新蛋白质的产生 将上述获得的突变基因插入到合适的基因载体中，转

　　化或转导到宿主细胞之中，在适宜的条件下进行表达，就可产生出经过氨基酸置换的新的蛋白质或酶。