参考答案

　　一、名词解释

　　1.是在生物化学及其相关学科应用的各种技术。主要是指生物体内物质及其代谢产物，特别是生物大分子

　　的分离、检测、制备与改造技术。

　　2. 是在一定的条件下，用一定的溶剂处理样品，使欲分离的物质充分释放到溶剂中的过程。又称 “抽提”

　　或 “萃取”。

　　3. 是通过改变某些条件或加入某种物质，使溶液中某种溶质的溶解度降低，从而从溶液中沉淀析出的技术。

　　4. 低盐浓度下蛋白质的溶解度随着盐浓度的升高而增加的现象。

　　5. 盐浓度升高到一定程度后，蛋白质的溶解度随着盐浓度的升高而降低，结果使蛋白质沉淀析出，这种现

　　象即为盐析作用。

　　6. 是利用蛋白质在 pI 时溶解度最低，以及不同的蛋白质有不同的pI 这一特性，对蛋白质进行分离纯化的方法。

　　7. 利用不同蛋白质在不同浓度的有机溶剂中的溶解度不同而使蛋白质分离的方法称为有机溶剂沉淀法。

　　二、填空：

　　1.高技术、高投入、高利润 2. 蛋白质、酶、核酸、多糖、脂类 3. 沉淀分离技术、层析分

　　离技术、电泳分离技术、超离心分离技术 4. 存在的部位、分子结构、溶解性质 5.溶剂、溶解度、温

　　度、pH 、浓度差 6. 盐浓度、温度、pH 值 7. 盐析沉淀、等电点沉淀、有机溶剂沉淀 8. Ks 分段、

　　β分段 9.硫酸铵 10. 核糖、脱氧核糖到 11. tRNA 12. 稀盐溶液提取、苯酚水溶液提取 13.蛋白

　　质、DNA 、苯酚、RNA 、多糖、水层 14. 有机溶剂沉淀法、等电点沉淀法、钙盐沉淀法、选择性溶剂

　　沉淀法 15. 异丙醇

　　三、问答题

　　1.进行细胞破碎的方法主要有①机械破碎法：是通过机械运动所产生的剪切力的作用使细胞破碎的方法。

　　②物理破碎法：用各种物理因素(温度、压力、超声波) 的作用使细胞破碎的方法。③化学破碎法：用化

　　学试剂可使细胞膜结构改变或破坏，改变细胞膜的通透性。④酶学破碎法：通过加入酶或利用细胞本身

　　的酶的作用，使细胞破碎的方法。

　　2.①提取、分离方法条件要温和使目的蛋白质和酶的活性和功能不受损害②尽量尽早除去各种杂质、脂

　　类、核酸及毒素。③设法除去变性的和不需要的蛋白质。④设法提高目的蛋白质的含量或生物活性。⑤

　　分离纯化要在缓冲溶液中进行。⑥建立灵敏、特异、精确的检测方法。⑦根据其存在的部位、分子结构

　　及溶解性质的不同选择不同的提取方法。

　　3.优点：①它在水中溶解度大;②其溶解度受温度的影响较小;③价廉易得;④不易引起蛋白质变性;

　　⑤分离效果比其它盐好。缺点：①缓冲能力差;②NH4+ 离子会干扰蛋白氮的测定。

　　4. ①防止核酸酶的降解: 在提取分离核酸时要降低核酸酶的活性，通常加入抑制剂和去激活剂。②防止

　　化学因素的降解: 避免强酸强碱。③防止物理因素的降解: 核酸大分子、高温、机械作用等均可以破坏核

　　酸分子的完整性，因此核酸提取适于在低温及避免剧烈搅拌等条件下进行。