第三节   酶促反应动力学

　　一、酶反应速度的测量

　　反应的速率也称速度(velocity)，是以单位时间内反应物或生成物浓度的改变来表示。

　　二、酶浓度对反应速度的影响

　　当研究某一因素对酶促反应速度的影响时，体系中的其他因素保持不变，而只变动所要研究的因素。

　　当底物浓度远大于酶浓度时，酶促反应速度与酶浓度的变化成正比。

　　三、底物浓度对酶反应速度的影响

　　(一)米-曼氏方程式

　　底物浓度对酶促反应速度的影响呈双曲线。当底物浓度较低时，V与[S]呈正比关系(一级反应);随着[S]的增高，V的增加逐步减慢(混合级反应);增到一定程度，V不再增加而是趋于稳定(零级反应)。

　　当[S]<< Km时，v = Vmax [S] /Km，反应速度与底物浓度成正比;当[S]>> Km 时，v≌Vmax，反应速度达到最大速度，再增加[S]也不影响V。

　　(二)Km的意义

　　1.当V/v =2时, Km =[S] , Km是反应速率v等于最大速率V一半时的底物浓度，单位为摩尔/升(mol/L)。

　　2.Km =K2+K3/K1，当K2>> K3时，Km值可用来表示酶对底物的亲和力。Km值越小，酶与底物的亲和力越大;反之，则越小。

　　3.Km是酶的特征性常数，它只与酶的结构和酶所催化的底物有关，与酶浓度无关。

　　Km和Vmax可用图解法根据实验数据测出。通过测定在不同底物浓度下的Vo，再用1/Vo对1/[S]的双倒数作图，又称Lineweaver-BurK作图法，即取米氏方程式倒数形式。

　　四、pH对反应速度的影响

　　每一种酶只能在一定限度的pH范围内才表现活力，酶表现最大活力时的pH称为酶的最适pH。

　　五、温度对反应速度的影响

　　多数哺乳动物的酶最适温度在37℃左右，植物体内酶的最适温度在50~60℃。也有些微生物的酶适应在高温或低温下工作。

　　六、激活剂对反应速度的影响

　　凡能使酶由无活性变为有活性或使酶活性增加的物质称为酶的激活剂(activator)。必需激活剂常是金属离子，如Mg2+、K+、Mn2+等, Mg2+是多种激酶和合成酶的必需激活剂;非必需激活剂是有机化合物和Cl-等，如胆汁酸盐是胰脂肪酶，Cl-是唾液淀粉酶的非必需激活剂。

　　七、抑制剂对反应速度的影响

　　使酶活性下降而不导致酶变性的物质称为酶的抑制剂。抑制剂作用有可逆和不可逆抑制两类。以可逆抑制最为重要。

　　(一)不可逆抑制作用

　　这类抑制剂通常以共价键与酶活性中心上的必需基团相结合，使酶失活，一般不能用透析、超滤等物理方法去除。

　　(二)可逆抑制作用

　　这类抑制剂通常以非共价键与酶可逆性结合，使酶活性降低或失活，采用透析、超滤的方法可去除抑制剂，恢复酶活性。