第三节 氨基酸的理化性质

　　一、两性解离与等电点

　　1.等电点(isoelectric point, pI)：在某一pH环境中，氨基酸解离成阳性离子及阴性离子的趋势相等，所带净电荷为零，在电场中不泳动。此时，氨基酸所处环境的pH值称为该种氨基酸的等电点(pI)。

　　2.带电状态判定

　　pI-pH < 0 …………… 带负电

　　pI-pH > 0 …………… 带正电

　　pI-pH= 0 …………… 不带电

　　3.等电点计算

　　(1)侧链为非极性基团或虽为极性基团但不解离的氨基酸：pI=½(pK1+pK2)

　　(2)酸性氨基酸(Glu、Asp)及Cys：pI=½(pK1+pKR)

　　(3)碱性氨基酸(赖、精、组)：pI=½(pK2+pKR)

　　二、光学性质

　　1.旋光性质

　　除Gly之外，其余蛋白质氨基酸都有手性碳原子，都具有旋光性。

　　2.紫外吸收

　　Trp、Tyr、Phe 含芳香环共轭双键系统，最大吸收峰分别在 279nm、278nm、259nm。

　　一般地，蛋白质最大光吸收在280nm处—紫外分光光度法测蛋白含量。

　　三、重要的化学反应

　　1.茚三酮反应

　　在弱酸性条件下，α-氨基酸与茚三酮共热，生成紫色化合物，最大光吸收570nm，Pro的茚三酮反应呈黄色。最大光吸收440nm。

　　2.Sanger反应(缺反应式图)

　　在弱碱溶液中，氨基酸的α-氨基与2,4-二硝基氟苯(DNFB) 反应，生成黄色的二硝基苯氨基酸(DNP-AA)。此反应最初被Sanger 用于测定肽链N-末端氨基酸。

　　3.Edman反应(缺反应式图)

　　在弱碱溶液中，氨基酸的α-氨基与PITC反应，生成苯氨基硫甲酰衍生物，后者在硝基甲烷中与酸作用环化，生成PTH衍生物。