药品质量检验与体内药物检测

　　一、药品检验程序与项目

　　取样→检验→记录报告

　　其中检验包含：性状、鉴别、检查、含量或效价测定。

　　1.对取样的要求：

　　(1)同批、真实、代表性的部分产品，取样方法科学;

　　(2)n≤100时：依据《样品抽样指导原则》取样;

　　(3)n>100时：取样件数应为根号N;

　　(4)全批、多部位、等量取样;

　　(5)一次取样一般为3倍全检量，贵重药品2倍全检量。

　　2.性状

　　熔点测定法

　　测定方法：毛细管测定法

　　第1法用于测定易粉碎的固体药品;

　　第二法用于测定不易粉碎的固体药品，如脂肪、脂肪酸、石蜡、羊毛脂等;

　　第三法用于测定凡士林或其他类似物质。

　　当各品种项下未注明时，均系指第1法。

　　旋光度测定法

　　比旋度：偏振光透过长1dm，且每1ml中含有旋光性物质1g的溶液，在一定波长与温度下，测得的旋光度。

　　比旋度以[α]tD表示(规定温度20℃、波长钠光谱589.3nm、浓度1g/ml和旋光管长度1dm的旋光度)。

　　比旋度是旋光物质的重要物理常数，可以用来区别药物或检查药物的纯杂程度，也可用来测定含量。

　　3.鉴别

　　常用鉴别方法有化学鉴别法、光谱鉴别法和色谱鉴别法。

　　(1)化学鉴别法

　　常见的呈色反应：

　　阿司匹林水解后与三氯化铁的反应(紫堇色);

　　去氧肾上腺素与三氯化铁试液反应显紫色;

　　肾上腺素与三氯化铁试液反应则显翠绿色。

　　重氮化-偶合反应(芳香第1胺反应)：磺胺甲噁唑与亚硝酸钠、β-萘酚的反应。

　　双缩脲反应：盐酸麻黄碱与硫酸铜的反应。

　　Vitali反应(托烷类生物碱反应)：硫酸阿托品与醇制氢氧化钾的反应。

　　Marquis反应：吗啡与甲醛一硫酸的反应;

　　硫色素反应：维生素B1与铁氰化钾的反应;

　　褪色反应：司可巴比妥钠可使碘试液褪色，维生素C可使二氯靛酚钠试液褪色。

　　常见的沉淀反应：

　　苯巴比妥与重金属银盐的反应：一银盐，二银盐;

　　葡萄糖与碱性酒石酸铜的反应。

　　常见的气体生成反应：

　　尼可刹米与氢氧化钠的反应：二乙胺。

　　常见的焰色反应：

　　钠盐—鲜黄色;钾盐—紫色;钙盐—砖红色。

　　【最佳选择题】

　　阿司匹林可用三氯化铁鉴别的原理是

　　A.三氯化铁被还原而显色

　　B.阿司匹林被氧化而显色

　　C.阿司匹林与三价铁配位而显色

　　D.阿司匹林水解产物水杨酸与三价铁配位而显色

　　E.阿司匹林水解产物水杨酸被氧化而显色

　　『正确答案』D

　　『答案解析』阿司匹林水解后与三氯化铁的反应(紫堇色)

　　【配伍选择题】

　　A.芳香第1胺类的反应

　　B.丙二酰脲类的反应

　　C.绿奎宁反应

　　D.托烷生物碱类的反应

　　E.与二氯靛酚钠试液的反应

　　1.鉴别苯巴比妥依据的反应是

　　2.鉴别维生素C依据的反应是

　　3.鉴别硫酸奎宁依据的反应是

　　4.鉴别磺胺甲噁唑依据的反应是

　　『正确答案』BECA

　　『答案解析』丙二酰脲的银盐反应：巴比妥类+碳酸钠+硝酸银→白色沉淀，巴比妥属于环丙二酰脲类化合物;

　　维生素C(具还原性)使二氯靛酚钠试液褪色;

　　绿奎宁反应系含氧喹啉(喹啉环上含氧)衍生物的特征反应硫酸奎宁和硫酸奎尼丁都显绿奎宁反应，在药物微酸性水溶液中，滴加微过量的溴水或氯水，再加入过量的氨水溶液，即显翠绿色。

　　具有芳伯氨基的芳香第1胺类药物，如磺胺甲噁唑的鉴别是在酸性条件下芳伯氨基与亚硝酸钠反应生成重氮盐，再与碱性β-萘酚缩合可生成橙黄色至猩红色的偶氮化合物

　　(2)光谱鉴别法：紫外光谱法和红外光谱法。

　　光谱范围：

　　200nm～400nm为紫外区;

　　400nm～760nm为可见区;

　　760nm～2500nm为近红外区;

　　2.5μm～25μm(波数4000～400cm-1)为中红外光区。

　　紫外光谱鉴别法(UV)：比较最大或最小吸收波长。

　　红外分光光度法(IR)：纵坐标为透光率(T%);横坐标为红外光波数(cm-1)。

　　官能团区：4000～1300cm-1

　　指纹区：1300～400cm-1

　　常见官能团的红外吸收

　　(3)色谱鉴别法：一种分离分析方法。

　　保留时间tR从进样开始到某个组分色谱峰顶点的时间间隔。

　　半高峰宽Wh/2=2.355σ　峰高一半处的峰宽。

　　峰宽W=4σ=1.699Wh/2　色谱峰两侧的拐点作切线，在基线上的截距。

　　峰高h　组分色谱峰顶点至时间轴的垂直距离。

　　峰面积A　组分色谱峰与基线围成的区域的面积。

　　描述色谱峰的三大参数：

　　①峰位(用保留时间表示，用于定性);

　　②峰高或峰面积(用于定量);

　　③峰宽(用于衡量柱效)。

　　用于鉴别的色谱法有薄层色谱法(TLC)和有效液相色谱法(HPLC)

　　TLC法一般采用对照品(标准品)比较法，要求供试品斑点的比移值(Rf)与对照品的一致。

　　HPLC法一般采用对照品(标准品)比较法，要求供试品溶液中药物色谱峰的保留时间(tR)与对照品的一致。

　　4.检查(纯度检查)

　　化学法、光谱法、色谱法。

　　(1)化学分析法—杂质的限量检查

　　杂质限量：药物中所含杂质的最大允许量。

　　一般杂质检查常用

　　方法对比：药物　化学反应　颜色(浑浊)

　　杂质对照品(定量)　化学反应　颜色(浑浊)

　　常见检查：

　　阿司匹林溶液澄清度检查，检测不溶于碳酸钠的酯类;

　　重金属检查(以铅为代表)，pH3.5的醋酸盐缓冲液，反应试剂为硫代乙酰胺。

　　炽灼残渣：

　　检查药物中的无机杂质，温度700℃～800℃;

　　若继续重金属检查，则用500℃～600℃。

　　(2)光谱分析法

　　特殊杂质：在特定波长处具有显著吸收的特定有关物质。

　　常见检查

　　肾上腺素中的酮体——紫外-可见分光光度法

　　地蒽酚中的二羟基蒽醌——紫外-可见分光光度法

　　硫酸阿托品中的莨菪碱——旋光度法

　　(3)色谱分析法

　　特定杂质、有关物质与残留溶剂的检查。

　　薄层色谱法：杂质对照(有杂质对照品)、自身稀释对照(无杂质对照品)。

　　有效液相色谱法：内标法、外标法(有杂质对照品)、加校正因子的主成分自身对照法、不加校正因子的主成分自身对照法、面积归一化法。

　　气相色谱法(GC)：主要检查残留溶剂。