第四节 炔雌醇及其制剂的分析

　　一、鉴别

　　1.硫酸荧光反应 加硫酸呈橙红色，显黄绿色荧光。加水生成玫瑰红色沉淀。

　　2.与硝酸银反应 生成白色炔化银沉淀

　　3.红外光谱法

　　二、其他甾体检查：HPLC，不加校正因子的主成分自身对照法。 显示的杂质峰数不得超过4个;各杂质峰面积及其总和不得大于对照溶液主峰面积的1/2和3/4。

　　三、含量测定

　　1.原料药 HPLC，内标法

　　2.片剂 KOBER反应比色法

　　指雌激素与硫酸-乙醇反应呈红色，并在530nm附近有最大吸收。由于辅料对测定有干扰，先用水提取。

　　炔雌醇片的含量测定方法如下：

　　1.对照品溶液制备：精密称取炔雌醇对照品25mg，置100ml量瓶中，加无水乙醇振摇使溶解，并稀释至刻度，摇匀;精密量取2ml，用无水乙醇稀释至50ml，摇匀，即得(10μg/ml)。

　　2.供试品溶液的制备：取本品10片或20片，置具塞试管中，加水10ml，振摇使崩散、置水浴上加热至半透明，放冷，精密加氯仿10ml，密塞，振摇20min，静置分层后，吸取上层水溶液，加无水硫酸钠0.5g，振摇脱水后，经干燥滤纸滤过，弃取初滤液，精密量取续滤液2ml，置水浴中蒸干后，低温干燥，放冷，精密加无水乙醇使溶解成每1ml中约含10μg的溶液，即得。

　　3.测定法：精密量取对照品溶液及供试品溶液各1ml，分别置试管中，在冰浴中冷却，各精密滴加硫酸-乙醇(4：1)4ml，摇匀显色后，在530nm的波长处分别测定吸收度，计算，即得。