第四节 地西泮和氯氮卓的分析

　　苯骈二氮杂卓类药物为含氮杂原子、六元和七元环并合而成的有机化合物，本类药物结构中，二氮杂卓七元环上氮原子具有强的碱性，结构中的环在强酸性溶液中可水解，形 成相应的二苯甲酮衍生物，其水解产物所呈现的某些特性也可供鉴别或含量测定之用。

　　一、鉴别

　　(一) 地西泮

　　1.硫酸-荧光反应 苯骈二氮杂卓类药物溶于硫酸后，在紫外光(365nm)下，呈现不同颜色的荧光。地西泮为黄绿色。

　　2.氯元素反应 本药物为有机氯化合物，用氧瓶燃烧法破坏，生成氯化氢，以5%氢氧化钠溶液吸收，加硝酸酸化，显氯化物反应。

　　3. 紫外和红外吸收光谱

　　(二) 氯氮卓

　　1.水解后重氮化-偶合反应 氯氮卓的盐酸溶液，缓缓加热煮沸，水解生成二苯甲酮衍生物，具有芳伯氨基。加亚硝酸钠和碱性β-萘酚试液，生成橙红沉淀。

　　2.沉淀反应 加碘化铋钾产生橙色沉淀。

　　3.紫外光谱

　　二、有关物质检查

　　地西泮在生产工艺过程或贮藏期间出现分解，产生2-甲氨基-5-氯二苯酮杂质。

　　药典采用高低浓度对比法检查地西泮原料药和片剂中有关物质。

　　地西泮注射剂采用HPLC法测定含量，所以在含量测定条件下，采用主成分自身对照法检查分解产物。

　　三、含量测定

　　(一) 非水溶液滴定法 ：本法基于该类药物结构中，二氮杂卓七元杂环上氮原子的弱碱性，可用非水溶液滴定法测定其含量。由于该类药物的碱性强弱和存在状态不同，测定时所采用的溶剂、指示剂及指示终点的方法也不尽相同。

　　(二) 紫外分光光度法 ：药物的片剂或片剂均匀度与溶出度的测定均采用此法。

　　(三) 高效液相色谱法

　　我国药典：地西泮注射液。地西泮注射液曾用萃取后分光光度法测定含量，因苯甲酸、苯甲酸钠等附加剂有干扰，故新版药典改用HPLC法。此法操作简便、可消除干扰。

　　色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇-水(70：30)为流动相;检测波长为254nm。理论板数按地西泮峰计算应不低于1500，地西泮峰和内标物质峰的分离度应大于1.5。

　　本法为反相HPLC法，以萘为内标，用内标法加校正因子测定含量。