第二十一章　其他革兰阴性杆菌及检验(小细菌)

　　本章内容

　　嗜血杆菌属

　　(一)流感嗜血杆菌

　　(二)其他嗜血杆菌

　　弗朗西斯菌属

　　鲍特菌属

　　布鲁菌属

　　巴斯德菌属

　　标题记忆

　　关联记忆

　　图像记忆

　　小细菌

　　·菌体小，形态近似球杆菌。

　　·无动力，无芽胞。

　　·对营养要求较苛刻。

　　·主要包括嗜血杆菌属、鲍特菌属、布鲁菌属等。

　　嗜血杆菌属

　　·G-小杆菌，呈球杆状，有时呈杆状、长丝状等多形态。

　　·无动力、无芽胞。

　　·包括16个菌种，其中与临床有关的有流感、副流感、溶血、副溶血、嗜沫、副嗜沫、杜克及埃及嗜血杆菌。

　　·须在人工培养基中加入新鲜血液才能生长，故称嗜血杆菌。

　　流感嗜血杆菌——生物学特性

　　·形态与结构

　　形态：急性感染标本为短小球杆菌，恢复期或长期人工传代培养后可呈多形态性。

　　染色：G-，着色较浅。苯酚复红或亚甲蓝单染色，呈现两端浓染现象。

　　特殊结构：毒力株(黏液型菌株)在营养丰富的培养基上，6～8h有明显荚膜。无鞭毛，无芽胞。

　　流感嗜血杆菌——生物学特性

　　·培养特性

　　营养要求：高。

　　气体环境：需氧或兼性厌氧。

　　温度环境：最适37℃，pH7.6～7.8。

　　·培养特性

　　菌落特点：

　　普通培养基中须加入X和V因子。

　　加热血平板(巧克力平板)：18～24h后圆形、光滑湿润、边缘整齐，呈露滴状的小菌落。在其中加一定量抗生素(万古霉素/杆菌肽/克林霉素)制成选择培养基可提高检出率。

　　在葡萄球菌菌落周围生长的流感嗜血杆菌菌落较大，离葡萄球菌菌落越远的菌落越小，此称为卫星现象，这有助于对流感嗜血杆菌的鉴定。

　　液体培养基：有荚膜的菌株均匀混浊生长，无荚膜的菌株颗粒状沉淀生长。

　　流感嗜血杆菌——微生物检验及鉴定

　　·标本采集：根据病情采集相应的临床标本。

　　·形态学检查：G-短小杆菌或多形态杆菌。

　　·分离培养：

　　巧克力琼脂平板或选择性巧克力琼脂平板，经37℃培养24～48h。根据菌落形态、涂片染色、卫星现象，X、V因子需求与否判断。

　　·生化试验(鉴定)

　　·荚膜肿胀试验

　　流感嗜血杆菌——致病性及临床意义

　　·主要通过呼吸道感染，引起原发性或继发性感染。

　　·原发性感染多由b型荚膜强毒株引起，为急性化脓感染，如脑膜炎、鼻咽炎、咽喉会厌炎、化脓性关节炎、心包炎及败血症等。

　　·继发感染主要在流感、麻疹、百日咳、肺结核等感染后发生，多为无荚膜菌株引起。如慢性支气管炎、中耳炎、鼻窦炎等。

　　其他嗜血杆菌

　　1.副流感嗜血杆菌：形态、菌落与流感嗜血杆菌相似，也能产生卫星现象，在生长过程中只需要V因子而不需要X因子。可引起呼吸系统的感染、心内膜炎等。

　　2.杜克嗜血杆菌：生长需要X因子，不需要V因子。可引起软性下疳。

　　3.埃及嗜血杆菌

　　4.嗜沫嗜血杆菌：生长只需X因子，不需V因子。可引起心内膜炎、脑水肿、肺炎、脑膜炎、继发性菌血症等。

　　5.溶血嗜血杆菌：生长需X因子和V因子。可引起呼吸道感染。

　　弗朗西斯菌属

　　·主要有土拉弗朗西斯菌和新凶手弗朗西斯菌。

　　·是野生动物的自然疫源性疾病，人类多由于接触患病动物而感染。

　　鲍特菌属

　　·G-小杆菌。

　　·无芽胞，有荚膜。

　　·抵抗力弱，56℃30分钟、日光照射1小时可致死亡。

　　·营养要求很高，血平板及巧克力平板不生长，常用鲍-金培养基进行分离培养。

　　·不发酵糖类，硝酸盐、枸橼酸盐、H2S、吲哚、明胶阴性。

　　·毒素：百日咳毒素、丝状血细胞凝集素和腺嘌呤环化酶毒素。

　　·百日咳鲍特菌和副百日咳鲍特菌是百日咳的病原菌。

　　布鲁菌属

　　·G-小杆菌或球杆菌。

　　·无动力，无芽胞和荚膜。

　　·需氧，营养要求较高。

　　·能利用葡萄糖等糖类，尿素酶阳性，硝酸盐还原试验阳性。

　　·含有A抗原和M抗原。

　　·凝集反应，PCR检测，抗体检测。

　　·人畜共患，引起布鲁菌病，主要表现为菌血症。通过皮肤、呼吸道和消化道感染，首先侵犯局部淋巴结，之后入血，再进入各脏器，患者热型呈波浪热。

　　巴斯德菌属

　　·G-球杆菌。

　　·无动力，无芽胞。

　　·需氧或兼性厌氧菌。

　　·触酶、氧化酶阳性;发酵葡萄糖产酸不产气，不发酵乳糖，能还原硝酸盐。

　　·临床常见的多为杀巴斯德菌及嗜肺巴斯德菌、溶血巴斯德菌、犬巴斯德菌。人类感染多是通过被狗、猫咬伤或抓伤所致。

　　·引起菌血症：肺炎链球菌、葡萄球菌、伤寒沙门菌、鼠疫耶尔森菌、布鲁杆菌、单核李斯特菌、结核分枝杆菌等。

　　·不引起菌血症：志贺菌、霍乱弧菌、肉毒梭菌、破伤风梭菌、白喉棒状杆菌等。

　　·特殊培养基

　　流感嗜血杆菌——巧克力培养基

　　肠球菌——高盐(6.5%NaCl)40%胆汁培养基

　　产气荚膜梭菌——牛乳培养基"汹涌发酵"现象

　　霍乱弧菌——碱性琼脂平板

　　沙门菌、志贺菌——SS琼脂

　　白喉棒状杆菌——吕氏血清斜面，亚碲酸钾血琼脂

　　结核分枝杆菌——罗-琴培养基(罗氏培养基)

　　军团菌属——活性炭-酵母浸出液琼脂(BCYE)培养基

　　·专性需氧

　　奈瑟菌属

　　结核分枝杆菌

　　假单胞菌属

　　不动杆菌属

　　军团菌属

　　·专性厌氧

　　破伤风杆菌

　　肉毒梭菌

　　双歧杆菌

　　优杆菌属

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