第十章　细菌的生物化学试验

　　碳水化合物的代谢试验

　　1.糖（醇、苷）类发酵试验：

　　接种的细菌，若能分解培养基中的糖(醇、苷)类产酸时，培养基中的指示剂呈酸性反应。若产气可使液体培养基中导管内或半固体培养基内出现气泡，固体培养基内有裂隙等现象。若不分解，培养基中除有细菌生长外，无任何其他变化。

　　鉴定细菌最主要和最基本的试验。

　　2.氧化-发酵试验（O/F试验）：主要用于肠杆菌科细菌与非发酵菌的鉴别， 前者均为发酵型，而后者通常为氧化型或产碱型。

　　3.β-半乳糖苷酶试验(ONPG试验)：迟缓发酵乳糖菌株的鉴定。

　　碳水化合物的代谢试验

　　4.七叶苷水解试验：D群链球菌与其他链球菌的鉴别，前者阳性，后者阴性。也可用于革兰阴性杆菌及厌氧菌的鉴别。

　　5.甲基红试验：鉴别大肠埃希菌与产气肠杆菌，前者为阳性，后者为阴性。

　　6.V-P试验：常与甲基红试验一起使用，因为前者为阳性的细菌，后者通常为阴性。

　　蛋白质和氨基酸的代谢试验

　　其理为不同种类的细菌分解蛋白质的能力不同。细菌对蛋白质的分解，一般先由胞外酶将复杂的蛋白质分解为短肽(或氨基酸)，渗入菌体内，然后再由胞内酶将肽类分解为氨基酸。

　　1.明胶液化试验

　　某些细菌可产生一种胞外酶-明胶酶，能使明胶分解成氨基酸，从而失去凝固力，半固体的明胶培养基成为流动的液体。

　　应用：肠杆菌科细菌的鉴别。 有些厌氧菌如产气荚膜梭菌、脆弱类杆菌等也能液化明胶。另外多数假单胞菌也能液化明胶。

　　2.吲哚（靛基质）试验

　　某些细菌具有色氨酸酶，能分解蛋白胨水中的色氨酸生成吲哚(靛基质)，当加入吲哚试剂(对位二甲氨基苯甲醛)后则形成红色的玫瑰吲哚。

　　应用：主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。

　　3.硫化氢试验

　　某些细菌能分解培养基中的含硫氨基酸(如胱氨酸、半胱氨酸)产生硫化氢，硫化氢遇铅或亚铁离子则形成黑褐色的硫化铅或硫化铁沉淀。此试验可间接检测细菌是否产生硫化氢。

　　应用：主要用于肠杆菌科中属及种的鉴别。

　　4.尿素分解试验

　　原理：某些细菌具有尿素分解酶，能分解尿素产生大量的氨，使培养基呈碱性。

　　应用：主要用于肠杆菌科中变形杆菌属细菌的鉴定。

　　5.苯丙氨酸脱氨酶试验

　　某些细菌可产生苯丙氨酸脱氨酶，使苯丙氨酸脱去氨基，形成苯丙酮酸，加入氯化铁试剂后产生绿色反应。

　　应用：主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。

　　6.氨基酸脱羧酶试验

　　具有氨基酸脱羧酶的细菌，能分解氨基酸使其脱羧生成胺(赖氨酸→尸胺，鸟氨酸→腐胺，精氨酸→精胺)和二氧化碳，使培养基变碱。使指示剂显示出来。

　　应用：主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。

　　碳源和氮源利用试验

　　1.枸橼酸盐利用试验：肠杆菌科中菌属间的鉴定。

　　2.丙二酸盐利用试验：肠杆菌科中属间及种的鉴别。

　　各种酶类试验

　　1.氧化酶试验：肠杆菌科细菌与假单胞菌的鉴别。

　　2.过氧化氢酶试验(触酶试验)：革兰阳性球菌初步分群。

　　3.硝酸盐还原试验：细菌鉴定中广泛应用。

　　4.脂酶试验：厌氧菌的鉴别。

　　5.卵磷脂酶试验：厌氧菌的鉴定。

　　6.DNA酶试验：革兰阳性球菌中只有金黄色葡萄球菌产生DNA酶， 在肠杆菌科中沙雷菌和变形杆菌产生此酶。

　　7.凝固酶试验：葡萄球菌鉴别。

　　8.CAMP试验：链球菌中，只有B群链球菌CAMP试验阳性。

　　9.胆汁溶菌试验：肺炎链球菌与甲型链球菌的鉴别。

　　抑菌试验

　　1.O/129抑菌试验：弧菌科的属间鉴别。

　　2.杆菌肽试验：A群链球菌与非A群链球菌的鉴别。

　　3.奥普托欣试验：肺炎链球菌与其他链球菌的鉴别。

　　细菌分离培养和鉴定-生化反应与鉴定

　　碳水化合物代谢试验蛋白质和氨基酸代谢试验碳源和氮源利用试验各种酶类试验抑菌试验

　　糖类发酵试验 明胶液化试验枸橼酸盐利用试验氧化酶试验O/129抑菌试验

　　氧化-发酵试验吲哚(靛基质)试验丙二酸盐利用试验过氧化氢酶试验(触酶试验)杆菌肽试验

　　β-半乳糖苷酶试验硫化氢试验　 硝酸盐还原试验 奥普托欣试验

　　七叶苷水解试验尿素分解试验　 脂酶试验

　　甲基红试验苯丙氨酸脱氨酶试验　 卵磷脂酶试验

　　V-P试验氨基酸脱羧酶试验　 DNA酶试验

　　凝固酶试验

　　CAMP试验

　　胆汁溶菌试验

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