第六章　微生物学检验概述

　　临床微生物检验的目的和要求

　　临床微生物检验的目的

　　1.为临床感染性疾病的诊断提供病原学依据。

　　2.为临床感染性疾病的治疗提供参考用药的信息。

　　3.为医院感染提供病原微生物及其耐药性动态信息。

　　4.改进或更新临床微生物检验的方法。

　　临床微生物学检验的要求

　　1.快速、准确地提出检验报告。

　　2.检验人员必须有较丰富的微生物学基础知识和熟练、正确的操作技能，必须养成有菌观点和无菌操作的习惯。

　　3.临床微生物检验必须进行全面质量控制，并参加和接受质量控制考核。

　　4.重视实验室消毒灭菌工作。

　　诊断试验的选择原则

　　1.选择有鉴定价值的试验。

　　2.选择简易、快速、方便的试验。

　　3.综合考虑试验的敏感性和特异性。

　　标本的采集和运送

　　标本采集一般原则

　　1.早期

　　2.无菌

　　3.方法

　　4.适量

　　5.安全

　　1.早期采集

　　病程早期、急性期或症状典型时，而且必须在使用抗生素或其他抗菌药物之前采集。

　　2.无菌采集

　　严格进行无菌操作;

　　与外界相通的腔道，如窦道标本应由窦道底部取样;

　　从正常菌群寄生部位(如口腔)采集的标本，采用特殊选择性培养基;

　　盛标本的无菌容器须先经高压灭菌、煮沸、干热等物理方法灭菌，或用一次性无菌容器，而不能用化学处理。

　　3.根据目的菌的特性用不同的方法采集

　　如尿液标本，疑为厌氧菌感染时，应以无菌注射器从耻骨上缘行膀胱穿刺术抽取;若怀疑是需氧或兼性厌氧菌的感染，则可通过自然导尿获取标本。

　　4.采集适量标本

　　采集量不应过少，有些标本还要注意在不同时间采集不同部位标本。如肠热症患者，发病的第1周应采集血液，第2周应采集粪便和尿液，否则影响细菌检出率。

　　5.安全采集

　　采集标本时要注意安全，防止传播和自身感染。

　　标本的处理

　　立即送检：一些对环境敏感的细菌如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血杆菌等应保温并立即送检。

　　适当保存：支气管洗液、心包液、痰、尿等标本应保存在4℃环境中。脑脊液、滑膜液要在25℃保存。保存时间不超过24h。

　　安全防护

　　运送包装：防止渗漏。

　　微生物检验

　　直接镜检：初步诊断，5～10min。标本经涂片染色或制备湿片镜检，有些标本如尿液、脑脊液等经过离心浓缩后镜检出其初步结果对疾病诊断有参考价值。直接镜检对于确定进一步检出步骤及鉴定方法也很有帮助。另外，直接镜检还可评价标本是否符合检验要求。

　　快速诊断：特异性抗原和核酸检测。

　　直接药敏试验

　　报告：直接镜检2h内报告;初步鉴定和直接药敏24h;最后鉴定和细菌药敏结果一般不超过3d。

　　血清学诊断

　　人体感染病原体后经过一定时间产生特异性抗体，这种抗体在体内一般可持续数月或更长，用已知抗原检测病人血清中抗体。

　　一般要在病程早期和晚期分别采血清标本2～3份检查，抗体效价呈4倍或以上增长才有价值。

　　临床微生物实验室安全措施和质量保证

　　实验室感染来源

　　1.微生物气溶胶。

　　2.接触感染材料或使之附着于衣服带出室外、菌液滴落于物体表面，注射时不慎刺破皮肤等。

　　感染性废弃物的处理

　　1.任何污染材料未经消毒不能拿出实验室。

　　2.液体废弃物必须收集在防漏、未破的容器内，经高浓度的化学消毒剂处理。

　　3.对剩余标本、接种过的培养基、菌种等丢弃前均需适当消毒。

　　4.动物房的废物在处理前及动物笼被清洗前均需消毒，最好经高压蒸气灭菌。

　　5.对于任何有污染的锐器如针头、注射器、玻片等在处理前不要用手接触。

　　微生物实验室的室内质控

　　1.对细菌检验人员的要求;

　　2.操作手册;

　　3.仪器设备的功能监测;

　　4.培养基的质量控制;

　　5.试剂、染色液以及抗生素的质量控制;

　　6.标本检验的质量控制;

　　7.标准菌株的来源和保存及室内质量的全面控制。

　　动物试验

　　主要用途：分离和鉴定病原微生物，检测细菌毒性产物，观察病原微生物的致病性。

　　实验动物：大鼠、小鼠、豚鼠、家兔及绵羊等。

　　接种方法：皮下/皮内/肌内/腹腔/静脉/脑内注射等。

　　发光分析技术

　　依赖酶或化学反应释放能量引起发光物质(如鲁米诺、荧光素等)发光的检测方法。

　　根据发光原理，主要分为生物及化学发光两种方法。

　　鲎试验

　　鲎试验阳性表明有革兰染色阴性菌或内毒素血症，也可用于生物制品或注射液的内毒素污染检测。

　　分子生物学在病原微生物中的应用

　　分子生物学：从分子水平上研究生物的生命活动及其规律的科学。

　　基因诊断：应用基因工程技术对生物体的基因组DNA片段及其转录产物进行定性和定量分析，进而对人体状态和疾病作出诊断。

　　(一)核酸杂交

　　(二)聚合酶链式反应

　　(三)生物芯片技术

　　以教材大纲知识点为指导，精作试题，让你备考复习做题一步到位，提高复习效率

　　在线题库、最新考试动态，网校课程辅导资料获取,加入卫生资格考试交流群：1101346508 有专门老师为你解答

　　【焚题库】检验技师考试题库【历年真题+章节题库+模拟考生+考前模拟试题】

模拟考场	检验技师章节练习	历年真题	每日一练
免费模拟机考在线测试	检验技师章节针对练习专项突破	每真题练习实战演练	每天10道最新试题
查看详情	查看详情	查看详情	查看详情