固相膜免疫测定

　　一、A1

　　1、以下属于固相膜的技术相关的是

　　A、孔径

　　B、流速

　　C、蛋白质结合力

　　D、均一性

　　E、以上都是

　　2、固相膜免疫测定中最为常用的固相膜是

　　A、玻璃纤维素(fiberglass)膜

　　B、尼龙(nylon)膜

　　C、聚偏氟乙烯(PVDF)膜

　　D、硝酸纤维素(NC)膜

　　E、以上都不是

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　　3、下列关于免疫渗滤试验叙述错误的是

　　A、免疫渗滤试验(IFA)用于检测各种传染病的抗体和肿瘤标志物等。

　　B、斑点金免疫渗滤试验(DIGFA)是将抗原或抗体点加在固相载体硝酸纤维素薄膜上

　　C、斑点金免疫渗滤试验(DIGFA)抗原抗体反应后，形成大分子胶体金复合物，从而使阳性结果在膜上呈现红色斑点

　　D、斑点金免疫渗滤试验(DIGFA)简化了操作步骤，成为床边检验(POCT)的主要方法之一

　　E、斑点金免疫渗滤试验(DIGFA)除试验盒本身外，还需要一些仪器设备辅助

　　4、关于免疫印迹法下列错误的是

　　A、免疫印迹法(IBT)亦称酶联免疫电转移印迹法

　　B、IBT是在蛋白质电泳分离和抗原抗体检测的基础上发展起来的一项检测蛋白质的技术

　　C、它将SDS-聚丙烯酞胺凝胶电泳的高分辨力与抗原抗体反应的高特异性相结合

　　D、第一阶段为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

　　E、第三阶段为电转移。此阶段分离的蛋白质条带肉眼可见

　　5、当前免疫电镜技术中应用最广的标记物是

　　A、辣根过氧化物酶

　　B、硝酸银

　　C、胶体金

　　D、铁蛋白

　　E、SPA

　　6、下列关于免疫印中需要注意的问题错误的是

　　A、影响免疫印迹成败的一个主要因素是抗原分子中可被抗体识别的表位的性质

　　B、免疫印迹实验中常选用单克隆抗体

　　C、有若干种方法常用于提高免疫印迹的灵敏度，一种是在电泳之前应用免疫沉淀法将抗原进行纯化和浓缩

　　D、IBT法在临床应用中存在一定的局限性

　　E、本法综合了SDS-PAGE的高分辨力和ELISA法的高特异性和敏感性，是一个有效的分析手段

　　7、下列有关斑点金免疫渗滤试验双抗体夹心法的叙述中，错误的是

　　A、以硝酸纤维素膜为载体

　　B、用胶体金标记抗原

　　C、首先滴加纯化的抗体试剂(首先用纯化的抗体固定在硝酸纤维素膜上)

　　D、膜中央出现红色斑点即为阳性反应

　　E、斑点颜色的深浅可提示阳性的强弱

　　8、免疫金制备时通常用到的高分子稳定剂有

　　A、葡聚糖

　　B、PEG2000

　　C、明胶

　　D、BSA

　　E、以上都是

　　9、制备胶体金常用的还原剂有

　　A、枸橼酸钠

　　B、鞣酸

　　C、维生素C

　　D、白磷

　　E、以上都是

　　10、下列有关胶体金特性的叙述中，错误的是

　　A、胶体金颗粒稳定、均匀地分散悬浮在液体中

　　B、电解质可使胶体金沉淀

　　C、较大颗粒的胶体金是橙黄色的

　　D、蛋白质有保护胶体金稳定性的作用

　　E、胶体金颗粒越小，其吸收波长越短

　　答案部分

　　一、A1

　　1、

　　【正确答案】 E

　　【答案解析】 以上选项均是固相膜的技术要求方面。

　　2、

　　【正确答案】 D

　　【答案解析】 固相膜免疫测定中常用的膜为玻璃纤维素(fiberglass)膜、尼龙(nylon)膜、聚偏氟乙烯(PVDF)膜和硝酸纤维素(NC)膜等。其中最常用为NC膜。

　　3、

　　【正确答案】 E

　　【答案解析】 斑点金免疫渗滤试验(DIGFA)是将抗原或抗体点加在固相载体硝酸纤维素薄膜上，制成抗原或抗体包被的微孔滤膜并贴置于吸水材料上，依次在膜上滴加标本、免疫胶体金及洗涤液等试剂并与硝酸纤维素膜上的相应抗体或抗原发生反应，过量试剂很快渗入吸水材料中。抗原抗体反应后，形成大分子胶体金复合物，从而使阳性结果在膜上呈现红色斑点。液体通过微孔滤膜时，渗滤液中的抗原或抗体与膜上的抗体或抗原相接触，起到亲和层析的浓缩，达到快速检测的目的，同时洗涤液的渗入在短时间内即可达到彻底洗涤的目的，简化了操作步骤，成为床边检验(POCT)的主要方法之一。本方法除试验盒本身外，不需要任何仪器设备。

　　4、

　　【正确答案】 E

　　【答案解析】 第一阶段为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SD孓PAGE)。抗原等蛋白样品经SDS处理后带负电荷，在聚丙烯酰胺凝胶中从阴极向阳极泳动，分子量越小，泳动速度就越快。此阶段分离效果肉眼不可见(只有在染色后才显出电泳区带)。第二阶段为电转移。此阶段分离的蛋白质条带肉眼仍不可见。第三阶段为酶免疫定位。将印有蛋白质条带的硝酸纤维素膜(相当于包被了抗原的固相载体)依次与特异性抗体和酶标第二抗体作用后，加入能形成不溶性显色物的酶反应底物，使区带染色。

　　5、

　　【正确答案】 C

　　【答案解析】 胶体金标记免疫电镜技术是利用胶体金在碱性环境中带有负电的性质，使其与抗体相吸附，从而将抗体标记。

　　6、

　　【正确答案】 B

　　【答案解析】 抗体的性质影响免疫印迹成败的一个主要因素是抗原分子中可被抗体识别的表位的性质。只有那些能识别耐变性表位的抗体可与抗原结合，多数多克隆抗血清中或多或少地含有这种类型的抗体，所以在免疫印迹实验中常选用多克隆抗体。

　　7、

　　【正确答案】 B

　　【答案解析】 斑点金免疫渗滤试验双抗体夹心法中，用胶体金标记的是抗体。

　　8、

　　【正确答案】 E

　　【答案解析】 多种蛋白质亦可以作为免疫金制备的高分子稳定剂。

　　9、

　　【正确答案】 E

　　【答案解析】 除以上选项外，硼氢化钠也是常用还原剂。

　　10、

　　【正确答案】 C

　　【答案解析】 胶体金的呈色性为：较大颗粒的胶体金呈紫红色;中等大小的胶体金是酒红色;最小的胶金是橙黄色。故C选项说法错误。