四、问答题

1.试述用于标记的荧光素应具备什么条件?

DA用于标记的荧光素应符合以下要求：①应具有能与蛋白质分子形成共价键的化学

基团，结合后不易解离，而未结合者易清除;②荧光效率高，与蛋白质结合后，仍能保持

较高的荧光效率;③荧光色泽与背景组织的色泽对比鲜明;④与蛋白质结合后不影响蛋白

质原有的生化与免疫学性质;⑤标记方法简单、安全无毒;⑥与蛋白质的结合物稳定，易

于保存。

2.试述荧光免疫显微技术基本原理。

DA荧光免疫显微技术是以荧光显微镜为检测工具，用荧光素标记特异性抗体或抗抗体，检测固定组织细胞上的抗原或血清中的抗体，常用于定性和定位检查的一门技术。

3.试述荧光免疫显微技术的临床应用。

DA临床常应用于：①血清中自身抗体的检测;②各种微生物的快速检查和鉴定;⑧寄生虫感染的诊断;④白细胞分化抗原的检测。

4.试述荧光偏振免疫测定基本原理。

DA荧光偏振免疫测定基本原理：荧光偏振免疫测定是利用荧光素经偏振光照射而跃入激发态，在回复至基态后可释出光子，经偏振仪形成偏振荧光，荧光偏振强度与荧光分子的大小成正比的关系而建立的免疫分析技术。

5.时间分辨荧光免疫测定法具有哪些优点?

DA时间分辨荧光免疫测定法具有特异性强，灵敏度高，标准曲线范围宽，分析速度快，标记物制备较简便、有效使用期长，无放射性污染等优点，因此是很有发展前途的超微量物质免疫分析技术。

6.简述荧光显微镜的滤片系统。

DA荧光显微镜的滤片系统有：⑴激发滤片(exciter filter)：位于光源和物镜之间，作用是使短光波的光通过吸收长波长的光;⑵吸收滤片(barrier filter)：位于物镜和目镜之间，作用是使荧光通过而阻断荧光以外的其它光。保护眼睛;⑶隔热滤片：位于灯室聚光器前，作用：阻拦红外线。

7.目前临床检验中常用的荧光物质有哪些?

DA目前临床检验中常用的荧光物质有：四乙基罗丹明、异硫氰酸荧光素、四甲基异硫氰酸罗

丹明、Eu3+的螯合物等。

8.简述荧光抗体的制备及纯化方法。

DA荧光抗体的制备方法纯化方法有透析法、凝胶过滤法、有撑搅拌法及透析法。

六、论述题

1.荧光抗体技术有哪些优缺点，在临床上有哪些应用?

荧光抗体技术的优点：(1)能做到快速、敏感、定位。(2)Ag 和Ab 的特异性与

形态的检查结合在一起;缺点：⑴对组织细胞进行微细结构的观察做不到;⑵标本不能永久

保存，荧光有自然消退现象，需及时观察及对照相;⑶有非特异性荧光的干扰。荧光抗体技术的应用：⑴病毒学方面：病毒鉴定和病毒在感染cell内的定位;⑵寄生虫学方面：用于寄生虫的诊断(鉴定、分型);⑶免疫学方面：研究、用于自身免疫病的诊断;⑷细菌学方面：菌种鉴定和Ag结构的研究。