二、填空题

1. 根据抗体制备的技术方法不同进行区分，人工制备的抗体可分为( 多克隆抗体 ), ( 单克隆抗体 )和( 基因工程抗体 )三大类型。

2.抗血清鉴定的主要内容包括( 抗体效价 )、( 抗体特异性 )、( 抗体纯度 )、( 抗体亲和力 )等四个方面。

3.制备特异性免疫血清时，常用( 亲和层析法 )和( 吸附法 )两种方法去除杂抗体。

4.HAT培养基中三种关键成分是( 次黄嘌呤

)、( 氨基蝶呤 )和( 胸腺嘧啶 )。

5.单克隆抗体的批量生产方法主要有两种( 小鼠体内诱生法 )和( 体外增殖培养法 )。

三、名词解释

1.单克隆抗体：是指仅识别单一抗原表位的B细胞杂交瘤产生的同源抗体，具有特

异性强、效价高、生物活性单一、理化性状高度均一等特点。

2.佐剂：是指先于抗原或与抗原一起注入机体，能够增强机体对该抗原的免疫应答

或改变免疫应答类型的物质。

3.基因工程抗体：是指应用DNA重组及蛋白工程技术对编码抗体的基因按不同的需

要进行改造和装配，经导人适当的受体细胞后重新表达的抗体，主要包括人源化抗体、小

分子抗体、双价特异性抗体和抗体融合蛋白等类型。

4.嵌合抗体：又称人一鼠嵌合抗体，是从杂交瘤细胞中分离出鼠源单抗功能性V区

基因，经基因重组与人抗体C区基因连接成嵌合基因后，插入适当的表达载体中，再共

同转染宿主细胞，表达人一鼠嵌合抗体分子。嵌合抗体保留了单抗对抗原的特异亲和性，

又含有人抗体C区的成分及其功能。

5.改形抗体：是应用基因工程技术在嵌合抗体基础上用人抗体可变区的骨架区序列

取代鼠源单抗CDR以外的骨架区序列，重新构成既有鼠源单抗的特异性又保持抗体亲和

力的人源化抗体，该抗体对人体几乎无免疫原性。

6.双特异性抗体：又称双功能抗体，它不同于天然抗体，其两个抗原结合部位具有

不同的特异性，可以同时与两种不同特异性的抗原发生结合。

四、问答题

1.简述单克隆抗体制备技术的主要步骤。

DA单克隆抗体是应用B细胞杂交瘤技术进行制备的，其主要操作步骤包括抗原免

疫、亲本细胞的选择和制备、细胞融合、杂交瘤细胞的筛选和克隆化、杂交瘤细胞体内接

种或体外增量培养、单克隆抗体的纯化与鉴定。

2.试述免疫血清应如何进行纯化。

DA免疫血清的纯化主要是指提纯免疫血清中的IgG并去除无关的杂抗体。提纯IgG

类抗体的方法有：硫酸胺盐析法粗提、离子交换层析法和亲和层析法，采用亲和层析法提

取IgG时，可使用纯化抗原或葡萄球菌蛋白A交联sephamse 4B制成层析柱。另外，还可

通过吸附法获得单价特异性抗血清。方法是将不含特异性抗原的杂抗原与戊二醛等双功能

试剂混合制成固相吸附剂，以吸附免疫血清中的杂抗体，或将杂抗原交联于sephamse 4B

上，通过亲和层析去除杂抗体。

3.叙述杂交瘤技术的基本原理。

DA杂交瘤技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细

胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。这种杂交瘤细胞具有两种亲

本细胞的特性，即既能够分泌抗体又能在体外长期繁殖，经过克隆化后成为单个细胞克

隆，分泌的抗体即为单克隆抗体。