第二节免疫检验的质量控制原则

一、标本的正确收集及处理

(一)内源性干扰因素

内源性干扰因素一般包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体、因使用鼠抗体治疗或诊断诱导的抗鼠Ig抗体、交叉反应物质等。

1.类风湿因子(RF) 为避免RF对免疫测定的干扰，通常可以采取下述措施：

(1)改变标记抗体。

(2)标本中RF用变性IgG预先封闭。

(3)测定抗原时，可在标本中加入可使RF降解的还原剂如2-巯基乙醇。

2.补体 由补体引起的干扰可通过下述方法避免：

(1)对临床血清标本加热灭活补体。

(2)包被或标记二抗使用特异的鸡抗体。

3.异嗜性抗体 人类血清中含有抗啮齿类动物(如鼠等)的免疫球蛋白(Ig)的抗体，即天然的异嗜性抗体。异嗜性抗体可通过交联固相和标记的单抗或多抗而出现假阳性反应。

4.因使用鼠抗体治疗或诊断诱导的抗鼠Ig抗体。

5.自身抗体。

6.溶菌酶。

(二)外源性干扰因素

1.标本溶血

2.标本被细菌污染

3.标本贮存时间过长

4.标本凝固不全

5.冷冻保存标本避免反复冻融

二、标准化操作及流程

改善测定精密度的措施必须首先着重在最不精密的步骤上，亦即最容易出现问题的步骤上，如加样、温育时间、温育方式、显色时间等。

应对试剂制备、测定方法和仪器操作写出“标准操作程序”(SOP)，但最重要的是在测定中，所有的实验技术人员在进行相关测定时，必须严格按相应的SOP进行操作。

三、标准品和质控品的应用

(一)标准品和质控品的分类

1.标准品 即含量确定的处于一定基质中的特性明确的物质。

2.质控品 是含量已知的处于与实际标本相同的基质中的特性明确的物质，这种物质通常与其他杂质混在一起。

(二)标准品和指控品的基本条件

标准品的基本条件：

1.标准品的基质通常为含蛋白的缓冲溶液，对测定结果无明显影响。

2.对标准品的浓度一般无特殊要求。

3.保持稳定性。

4.无已知的传染危险性。

5.靶值或预期结果已定。

质控品的基本条件：

1.质控品的基质则应尽可能与临床常规实验中的待测标本一致。

2.室内质控品则要求其所含待测物的浓度接近试验或临床决定性水平。

3.保持稳定性。

4.无已知的传染危险性。

5.对于质控品，可单批大量获得。

(三)标准品和质控品的定值方法

决定性方法是指具有高精密度及没有系统偏差的参考方法。

当没有决定性方法可使用时，则可确定一个参考方法。这种参考方法应有低测下限、不受非特异干扰及不与相关的化合物发生交叉反应，同时还应该容易得到。

(四)标准品和质控品的单位

目前可得到的国际标准品中特定分析物的浓度一般以IU/L表示，而已经很明确的物质如类固醇和甲状腺激素，则应以物质浓度(mol/L)表示。

(五)标准品值的溯源

从一级标准的值传递到最终试验所使用的校准物的过程通常由几个校准步骤组成，包括标准品和测定方法、缓冲液及其基质、稀释的控制、最终结果的统计学评价和质量控制等。当建立一个测定方法时，一级标准品的值要传递至二级、三级和(或)校准品，使得所建立的方法的测定值可溯源至一级标准品。

(六)与免疫测定标准品和质控品有关的组织机构

在国内免疫诊断试剂的审批由国家药品监督管理局(SDA)负责。

四、实验室的环境、设施和设备

作为一个临床实验室，首先应有充分的空间、良好的照明和空调设备，这是保证检验人员做好工作的前提。实验室仪器设备应保养良好。