第四节补体结合试验

补体结合试验(CFT)，是将免疫溶血作为指示系统，用以检测另一反应系统中抗原或抗体的传统方法。

早在1906年Wassermann就将其应用于梅毒的诊断，即著名的华氏反应。

该方法并非用于补体的检测，而是利用补体的溶细胞作用进行各种物理状态的抗原抗体测定。

一、试验原理

试验有5种成分参与反应，分属3个系统：

1.反应系统 已知抗原(或抗体)与待测抗体(或抗原)

2.补体系统

3.指示系统 SRBC与相应溶血素，试验时常将其预先结合，成为致敏绵羊红细胞(sensitized sheep red blood cell，SRBCs)。

因免疫复合物对补体的活化无特异性，既能被反应系统激活，也能与指示系统结合。

首先是反应系统与补体的作用。

第二步是指示系统利用剩余补体的反应。

如反应系统中有抗体或抗原，则形成免疫复合物而固定和消耗补体，使后加入的SRBC-抗SRBS指示系统无多余补体可利用，则无溶血反应发生，反之亦然。

因此，不溶血为补体结合试验阳性，而溶血为试验阴性。

试验中将反应系统的待测抗原(或抗体)作系列倍比稀释可作半定量测定。试验中以50%不溶血作为判断终点。

二、试验方法

(一)试剂的准备

1.抗原或抗体

2.补体 在补体结合试验中，采用豚鼠血清为补体。

3.待测标本 采血并及时分离血清用于检测或-20℃保存备用。试验前，应先将血清56℃加热30分钟(或60℃3分钟)以灭活补体。

(二)正式试验

根据反应体积的大小，有小量法、微量法等，其中小量法较为常用。

三、方法评价

补体结合试验是一经典的免疫技术，具有灵敏度高、可检测的抗原或抗体范围广泛等优点。