第二节酶免疫技术的分类

酶免疫技术按实际应用目的可分为两大类：

酶免疫测定(EIA)：液体标本中抗原或抗体的定性和定量。

酶免疫组织化学技术：组织切片或其他标本中抗原的定位。

根据抗原抗体反应后是否需将结合和游离的酶标志物分离，EIA一般可分为均相和异相两种类型。

一、均相酶免疫测定

EIA均相法反应原理如下：

均相法则是利用酶标志物与相应的抗原或抗体结合后，标记酶(E)的活性会发生改变，可以在不将结合和游离酶标志物分离的情况下，通过直接测定系统中总的标记酶活性改变，即可确定AgAb-E的形成量，并进而推算出样品中待检Ag的浓度。

(一)酶放大免疫测定技术(EMIT)

基本原理是半抗原与酶结合成酶标半抗原，保留半抗原和酶的活性。

当酶标半抗原与抗体结合后，所标的酶与抗体密切接触，使酶的活性中心受到影响而活性被抑制。

反应后酶活力大小与标本中的半抗原量呈一定的比例，从酶活力的测定结果就可推算出标本中半抗原的量。

(二)克隆酶供体免疫分析(CDEIA)

DNA重组技术可分别合成某种功能酶(如β-D半乳糖苷酶)分子的两个片段，大片段称为酶受体(EA)，小分子称作酶供体(ED)，两者单独均无酶活性，一定条件下结合形成四聚体方具酶活性。

克隆酶供体免疫测定(CDEIA)的反应模式为竞争法。

二、异相酶免疫测定

异相酶免疫测定是目前应用最广泛的一类标记免疫测定技术。依据测定方法是否采用固相材料以吸附抗原或抗体，又分为液相和固相酶免疫测定两类。

(一)异相液相酶免疫测定

主要用于检测样品中极微量的短肽激素和某些药物等小分子半抗原，近年来的发展使其灵敏度可达ng至pg水平，与放射免疫测定相近。

(二)固相酶免疫测定

如常用的酶联免疫吸附试验(ELISA)。