第四节抗血清的鉴定和保存

一、抗血清的鉴定

(一)抗体特异性的鉴定　常用双向免疫扩散法

观察沉淀线

若粗抗原及纯抗原之间皆出现一条沉淀线，且两者互相融合，则证明该动物已产生单价特异性抗体。

若纯化抗原出现一条，而粗抗原出现多条线，且其中一条沉淀线与纯抗原沉淀线相连接，也是成功的免疫。若不出现沉淀线，表示免疫失败。

(二)抗体效价的测定

颗粒性抗原采用凝集试验。可溶性抗原采用双向免疫扩散试验、ELISA。

测定抗体效价有两种稀释方法：

一种是将经过系列稀释的抗血清分别与一个浓度的抗原反应。

另一种是同时稀释抗原和抗血清，分别与不同浓度的抗血清进行双向免疫扩散试验(称为棋盘滴定)。

(三)抗体纯度的测定

采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)、双向免疫扩散试验、免疫电泳等方法。若只出现一条蛋白电泳区带说明抗体纯化已达到要求。若出现多条蛋白区带则表明抗血清中混有杂蛋白，须进一步纯化。

(四)抗体亲和力的测定

二、抗血清的保存

(一)2～8℃保存：用于短期保存

(二)冷冻保存：是常用的抗体保存方法

将抗体分为小包装，在-80～-20℃保存，一般可保存5年，效价不会明显下降，但应避免反复冻融。

(三)真空干燥保存：用真空冻干机进行干燥，封装后可长期保存，一般在冰箱中可保存5～10年。