第三节抗血清的制备

一、抗血清的概念

含有抗体的血清，就是抗血清。将免疫原接种给动物，该动物在抗原刺激下，体内多个B细胞激活并产生针对某一抗原的抗体，其混合物为多克隆抗体。采集动物血液，分离血清，即得到抗血清。

二、免疫动物的选择

能用于制备抗血清的动物主要是哺乳类和禽类，常用的有家兔、绵羊、豚鼠、鸡、山羊和马。

(一)抗原来源与动物种属的关系 抗原来源与动物种属差异越大，免疫原性越强，免疫效果越好。

(二)动物个体的选择 动物个体必须适龄、健康、体重合适。抗体需求量大时，可选用马、绵羊等大动物。抗血清需求量少时，可选用家兔、豚鼠和鸡等小动物。

(三)抗血清的分为R型和H型

R型抗血清是用家兔及其他动物免疫产生的抗体，抗原抗体反应比例合适范围较宽，适于作诊断试剂。

H型抗血清是用马等大动物免疫获得的抗体，抗原抗体反应比例合适范围较窄，一般用作免疫治疗。

(四)抗原的性质

对于蛋白质抗原大部分动物皆适合，常用的是山羊和家兔。在某些动物体内有类似物质时，蛋白质抗原对这些动物免疫原性极差，如IgE对绵羊、胰岛素对家兔、多种酶类对山羊，免疫后均不易产生抗体。

三、免疫程序

(一)免疫原的剂量

免疫原剂量过大或过小都可使动物产生免疫耐受，在一定剂量范围内，免疫原剂量越大，产生的抗体效价越高。

(二)免疫途径

有皮内、皮下、肌内、静脉、腹腔、淋巴结等途径皮内或皮下免疫时一般采用多点注射初次免疫一般选择皮内接种，加强免疫和颗粒性抗原一般选择静脉注射。宝贵抗原可选择淋巴结内微量注射法。

(三)免疫间隔时间

首次免疫后，因机体正处于识别抗原和进行B细胞活化增殖阶段，如果很快进行第2次注入抗原，极易造成免疫抑制。

若间隔时间太长，则刺激减弱，抗体效价不高，第1次与第2次免疫间隔时间以10～20天为好，第3次及以后的间隔一般为7～10天。

四、动物采血法

(一)颈动脉采血法 最常用

(二)心脏采血法

(三)静脉采血法

五、血清收集

动物采血后，应尽快分离血清，分离血清的方法常采用室温自然凝固，然后置37℃或4℃使血块收缩后，收集血清。