三、免疫耐受形成的影响因素

　　机体受抗原刺激后的反应是很复杂的，是否形成耐受，耐受持续时间的长短等取决于动物种类、品系、遗传性、机体的免疫状态与抗原的性质、剂量、注射途径等诸多因素。

　　(一) 动物的种属、品系和遗传性

　　不同种属动物，在耐受性的发生上有所不同。家兔、大鼠、豚鼠、鸡、山羊、灵长类和人都可致耐，但其难易程度不同。一般来讲，小鼠较其他动物易于建立，小鼠中的CBL/G较BALB/c易于建立。另外，耐受性建立后，持续时间长短亦可因动物的种属而异。用血清蛋白抗原注入各种新生动物，比较其致耐情况，发现家兔能产生完全耐受，持续长久;小鼠和豚鼠亦能产生完全耐受，但持续时间较家兔短，这种情况亦可因抗原不同而改变。另外，免疫耐受的形成和遗传因素也有关，如对某种抗原的低反应性动物，则易被该抗原诱发免疫耐受。关于遗传因素与耐受形成的关系中，MHC可能参与。有人报告用半抗原修饰的脾细胞诱发小鼠的耐受性时，被诱导的细胞除了要识别特异性抗原(脾细胞上修饰的半抗原)外，还须有MHC-Ⅱ类抗原分子的一致性(脾细胞上的与被诱导细胞上的相一致)，显示耐受性的发生亦受MHC的约束。

　　(二) 机体免疫系统的发育状态

　　一般认为机体在免疫系统上发育越不成熟，越容易建立耐受性。有人将无表面受体的未成熟细胞在适宜的条件下进行培养，24小时后有30%细胞成熟为有受体的B细胞，然后与适宜的抗原反应，B细胞可以分裂增殖为形成抗体的克隆。如果将无表面受体的细胞与A抗原一起培养在上述相同的条件下，24小时后再与A抗原起反应，则不能增殖形成抗体的克隆。因此，体外实验同样证实了免疫细胞如在未成熟时接触了抗原，待其成熟后就不能对相应的抗原发生免疫应答。成年动物一般不易形成耐受性，除非是机体的免疫功能暂时受到抑制的情况下，如先用适当剂量的免疫抑制剂、射线、抗淋巴细胞抗体处理或胸导管引流除去循环中的淋巴细胞等情况下，然后注射抗原，才能诱导免疫耐受。成年动物中诱导的耐受性往往呈现为部分耐受，即对抗原的反应并不完全丧失而是反应性降低，或表现为“分裂耐受性(split tolerance)”，即对抗原的某些表位产生耐受性;或表现为免疫偏离(immune deviation)，即机体选择性地产生体液免疫耐受性或细胞免疫耐受性。成年动物耐受性建立后，并不是终身保持的，保持时间的长短，取决于抗原在体内持续的时间。

　　(三) 抗原因素

　　1.抗原的理化性质

　　可溶性抗原比颗粒性抗原易于诱发耐受性，如血清白蛋白、丙种球蛋白都是很好的耐受原。耐受原与免疫细胞接触越全面，则无反应性越彻底。血清蛋白分子不易被吞噬细胞清除，很易透出血管均匀地分布在血管外，易和免疫细胞接触，是一种很好的耐受原，但如经聚合以后，则耐受原性可能变为免疫原性。某些多肽在加入佐剂时，可表现为免疫原，而在无佐剂时则成为耐受原。但是，一般的外来蛋白抗原容易被分解。因此，首次剂量必须大，才能维持一定的耐受时间。而对一些不易被分解的多糖抗原，耐受性则能持久存在。

　　2.抗原的剂量

　　一般说来，抗原的剂量大小与耐受性诱导的程度和持续时间的长短有密切的关系。大多数抗原在高剂量时能诱导免疫耐受，而低剂量时则引起免疫反应。抗原剂量越大，所引起的免疫耐受性越巩固持久。由于机体出生后免疫系统逐渐成熟，诱发耐受性所需要的抗原剂量也随年龄的增长而急剧增加，一旦造成耐受后，继续注入小剂量抗原时，可延长耐受性。有些抗原，如牛血清白蛋白，又表现为高剂量或低剂量时均可引起耐受(前者称为高带耐受，后者称为低带耐受)，而中等剂量时，则可引起免疫反应。

　　3.抗原注入的途径

　　抗原注入的途径不同，对诱发耐受性的难易程度也不一样。一般地，静脉注射最易引起免疫耐受性，其次为腹腔注射，皮下注射最不容易引起耐受性。IgG或白蛋白注入门静脉可致耐;而由周围静脉注入则引起免疫应答。

　　(四) 载体的性质 同一抗原决定基与不同的蛋白载体偶联后诱导的新生期耐受的机制不同。Diener等用TNP-HGG和TNP-BSA在CBA/J小鼠出生后24小时注入小鼠体内，以后每周注射2次，到8～9周龄时，用TNP-HGG和TNP-BSA攻击，结果发现二者均发生了对TNP的耐受无抗TNP的抗体产生。但是当用TNP-LPS、TNP-Ficoll攻击时，二者就出现了差异，只有用TNP-HGG诱导的耐性无抗体产生，而用TNP-BSA诱导的小鼠则表现出能产生抗TNP的IgM抗体，用有限稀释法对TNP特异的前体细胞的频率分析也证明，TNP-HGG诱导的耐受小鼠，其TNP前体细胞数明显较正常小鼠低，说明是存在着部分“排除”机制，但是用TNP-BSA诱导的耐受小鼠，TNP前体细胞数量与正常小鼠相同，说明不存在克隆排除现象，用细胞转移试验证明，由TNP-BSA诱导的免疫耐受是由Ts细胞引起的。

　　四、免疫耐受的终止

　　免疫耐受性建立以后，可以持续一段时间，但如无耐受原的再度刺激，则耐受性可以自然终止，也可以被诱导终止。

　　(一) 自然终止

　　新生期A鼠注射活的CBA小鼠淋巴细胞可以使成熟后的A鼠对CBA小鼠的移植皮片产生耐受，且持续一段较长的时间，因为CBA小鼠淋巴细胞在A鼠内继续进行分裂和持续存在。这类细胞一旦消失，耐受性即终止。应用BSA作为耐受原注射于新生期小鼠，亦可诱发小鼠产生对BSA的耐受，将这种无生命的物质作为耐受原时，必须在机体内长期存在，如抗原被代谢破坏而失去抗原性时，则耐受性随后将消失。BSA在体内会迅速被代谢破坏，因此耐受性自然消失较快，而DNP-D-GL(DNP与D谷氨酸和D赖氨酸共聚的结合物)由于不易被哺乳动物的酶所降解，被代谢破坏很慢，因而诱发的耐受性可以维持很长时间。

　　(二) 注入相关抗原

　　如果将致耐抗原结构改变后，再给动物注射，或使用与致耐原有交叉反应的抗原，可使已建立的耐受性破坏。如使家兔事先对BSA形成免疫耐受性，然后给耐受动物注射与BSA有微弱交叉反应的人血清白蛋白(HSA)，动物能重新对耐受原BSA起抗体反应，说明动物对BSA的耐受性被有效地终止。

　　(三) 注入与载体有交叉决定簇的抗原

　　将半抗原DNP连接在蛋白质载体BSA上，成为BSA-DNP，注入家兔，可使家兔形成对BSA-DNP致耐的T细胞(tTh)。再以BSA-DNP攻击，由于缺乏T细胞信号，因此不出现抗体反应;但以HAS-DNP攻击后，即可出现DNP抗体反应。这是因为HSA有部分不同，可刺激另外一些正常未致耐的Th细胞。新的Th识别HSA而被活化，向B细胞发出辅助信号，使B细胞分化、增强、产生DNP抗体，此即载体效应的应用。

　　(四) 注入同基因动物的正常淋巴细胞

　　有生命的耐受原如淋巴细胞、病毒等可在体内反复增殖，往往可持续存在较长时间，其耐受性不易消失，如注入相同基因动物的正常淋巴细胞，可以加速耐受性的消失，由于所注入的细胞并未对该抗原产生耐受性，故可对其发生免疫反应，并将其排斥，从而使耐受性中断。如注入的淋巴细胞是原先被该抗原致敏的淋巴细胞，则排斥反应出现更快，如新生鼠A注入鼠淋巴细胞形成A、B的淋巴细胞嵌合体，则具有对A和B的淋巴细胞的耐受性。再注入从成年A鼠来的B鼠淋巴细胞致敏的A鼠细胞，则嵌合体中所有来自B鼠的淋巴细胞均被排斥，因而脱离嵌合状态，对B鼠抗原就不再具有耐受性。