4.(2016·太原市检测)如图是培养生产人生长激素的转基因动物的过程，请据图回答下列问题。

(1)①是含有人生长激素基因的质粒，为了使人生长激素基因在羊乳腺细胞中表达，需要将目的基因与乳腺蛋白基因的________等调控组件重组在一起。②中是根据________基因表达的性状筛选出的细胞⑤。

(2)从白脸羊体内分离出的组织要经过酶处理变为单个细胞再培养，实验中使用的细胞通常在10代以内，以保持细胞正常的____________。

(3)为了使产药动物种群迅速扩大，现对⑥阶段的胚胎进行分割，一次给受体母羊移入多个胚胎，胚胎分割时应注意___________________。

(4)细胞④和细胞⑤融合所利用的原理是____________。产药动物的产生涉及__________(填“胚胎细胞核移植”或“体细胞核移植”)技术，该技术的成功率较______。

(5)移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础为___________________ __________________________。

【解析】　(1)因为目的基因上没有启动子，要使人生长激素基因在羊乳腺细胞中表达，需要将目的基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起。

(2)细胞在传至10～50代左右时，增殖会逐渐缓慢，以至于完全停止，这时部分细胞的细胞核型可能会发生变化，所以实验中使用的细胞通常在10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型。

(3)在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。

(4)细胞融合所利用的原理是细胞膜的流动性。根据图示可知，培养产生人生长激素的过程涉及体细胞核移植技术，该技术的成功率较低。(5)受体子宫对外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。

【答案】　(1)启动子　标记　(2)二倍体核型　(3)将内细胞团均等分割　(4)细胞膜的流动性　体细胞核移植　低　(5)受体子宫对外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应

5.(2016·青岛市二模)内蒙古农业大学生命科学院成功培育出了转肠乳糖酶基因的“低乳糖奶牛”。这头奶牛所产牛奶中不含乳糖或含量很低。请回答下列问题：

(1)构建基因表达载体时，需要获取仅在________细胞中特异性表达的基因的启动子，以使乳汁中的乳糖含量降低。构成启动子的基本单位是____________。

(2)将基因表达载体导入奶牛受精卵细胞常用的方法是________，与早期胚胎细胞和体细胞相比较，受精卵细胞的优势是_____________________。

(3)受精卵经过体外培养，形成________，再移植到受体母牛体内，移植到受体母牛子宫内的胚胎能够存活的原因是____________________。

(4)进行胚胎移植操作前，需要对取自早期胚胎的滋养层细胞利用________技术进行DNA分析，以鉴定其性别。人的肠乳糖酶基因在奶牛中是否成功表达，可以采用抗原—抗体杂交进行检测，其中的抗原是指____________。

【解析】　(1)因转肠乳糖酶基因特异性表达后，奶牛产的牛奶中不含乳糖或含量很低，由此可知构建基因表达载体时，需要获取仅在奶牛乳腺细胞中特异性表达的基因的启动子。启动子位于基因的上游，因此其基本单位是脱氧核苷酸。

(2)将基因表达载体导入奶牛受精卵细胞常用的方法是显微注射法，与体细胞相比，以受精卵细胞为受体细胞的优势是具有的全能性高，能直接发育成个体。

(3)移植到受体母牛体的早期胚胎一般为桑椹胚或囊胚，移植到受体母牛子宫内的胚胎能够存活的原因是受体母畜对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应。

(4)进行胚胎移植操作前，需要对取自早期胚胎的滋养层细胞利用DNA分子杂交以鉴定其性别。人的肠乳糖酶基因在奶牛中是否成功表达，可以采用抗原—抗体杂交进行检测，其中的抗原是指人的肠乳糖酶。

【答案】　(1)(优良)奶牛乳腺　脱氧核苷酸

(2)显微注射法　具有的全能性高，能直接发育成新个体

(3)桑椹胚或囊胚　受体母畜对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应

(4)DNA分子杂交(或DNA探针)　人的肠乳糖酶

6.(2016·江西上饶二模)目前，精子载体法逐渐成为具有诱惑力的制备转基因动物的方法之一，该方法以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精。如图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。请据图回答：

(1)精子载体法过程中外源基因能够整合到精子的________上是提高转化率的关键，因为受精时只有精子的________才能进入卵细胞中。

(2)过程②采用的是________技术，该过程中应对已经导入外源基因的精子进行________处理。

(3)利用转基因动物分泌的乳汁来生产药物的________反应器是科学家将药用蛋白基因与____________的启动子等调控组件重组在一起，然后导入哺乳动物的受精卵中，最终培养出转基因动物。

(4)过程③需要在________________(至少写出两点)等条件下进行。由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养细胞时需在培养基中加入________。

【解析】　(1)精子与卵细胞受精时，精子的头部进入卵细胞中，并释放其细胞核进入卵细胞，但细胞质未进入。因此为了提高转化率，必须将外源基因整合到精子的染色体中。

(2)②表示体外受精过程，因此需要采用体外受精技术。精子必须获能才可以与卵细胞发生受精作用。

(3)利用动物乳腺生产产品的技术称为动物乳腺反应器技术，将外源基因(药用蛋白基因)导入动物基因组中并定位表达于动物乳腺，利用了动物乳腺天然、高效合成分泌蛋白的能力。

(4)③是早期胚胎培养过程，该过程需要的条件有：无菌无毒环境、适宜的温度和pH、营养充足、一定气体环境等。动物细胞培养所需的培养液成分一般都比较复杂，除了含有各种无机盐、糖、氨基酸、促生长因子、微量元素等外，还要添加血清(或血浆)等物质。

【答案】　(1)染色体　头部(细胞核)

(2)体外受精　获能

(3)乳腺生物(乳房生物) 　乳腺蛋白基因

(4)无菌无毒、适宜的温度和pH、营养充足、一定气体环境(答出2点即可)　动物血清(或血浆)