4.利用紫外线诱变选育高产β-胡萝卜素的三孢布拉霉负菌，未突变菌不能在含有一定浓度的β-紫罗酮的培养基上生长，菌体随β-胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色。图甲为选育及提取获得β-胡萝卜素流程，请回答下列问题：

图甲

图乙

(1)用紫外线照射三孢布拉霉负菌的目的是__________________。为选出高产突变菌种，还应在培养基中添加__________________，在接入菌种前，应对培养基进行____________，以避免杂菌污染。

(2)某同学进行正确的接种操作后，平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是______________(填“稀释涂布平板法”或“平板划线法”);由于__________________________________________________，

所以培养基上只有少数菌能生长形成菌落。

(3)进行③过程时，应选取________色的菌落接种至液体培养基。过程⑥是________，用纸层析法鉴定提取的胡萝卜素粗品。

(4)将萃取的胡萝卜素样品与β-胡萝卜素标准样品层析后进行比对，结果如图，从图中分析可知，色带________为β-胡萝卜素。

【解析】　(1)利用紫外线处理三孢布拉霉负菌的目的是使其发生基因突变。由于未突变菌不能在含有一定浓度的β-紫罗酮的培养基上生长，所以为选出高产突变菌种，还应在培养基中添加一定浓度的β-紫罗酮。在接入菌种前，应对培养基进行高压蒸汽灭菌，以避免杂菌污染。

(2)使用稀释涂布平板法经过程②接种培养后的菌落分布符合题图;由于基因突变频率低和不定向，只有少数基因突变的菌才能生长、繁殖，所以只有少数菌能生长形成菌落。

(3)菌体随β-胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色，所以进行③过程时，应选取橙红色的菌落接种至液体培养基。分析题图可知，过程⑥为浓缩。

(4)分析图示可知，通过与标准样品层析结果对比可判断色带Ⅰ为β-胡萝卜素。

【答案】　(1)诱导其发生基因突变　一定浓度的β-紫罗酮　高压蒸汽灭菌　(2)稀释涂布平板法　基因突变频率低，只有少数基因突变的菌才能生长、繁殖　(3)橙红　浓缩　(4)Ⅰ

5.(2016·广西南宁一模)薄荷叶富含维生素、蛋白质和薄荷油，具有疏散风热、清利咽喉、消炎镇痛的作用。请回答下列问题：

(1)植物芳香油的提取方法有蒸馏法、压榨法和________等。提取薄荷油可以用水蒸气蒸馏法，该方法能利用水蒸气将____________的薄荷油携带出来。

(2)在提取薄荷油的过程中，向得到的油水混合物加入NaCl后，薄荷油将分布于液体的________(填“上层”或“下层”)，然后用________将这两层分开。分离得到的薄荷油油层中含有一定量的水分，可用____________吸水。

(3)可用植物组织培养的方法对薄荷进行扩大培养，在接种前工作台需用__________________擦拭一遍。之后所有的接种操作都必须在____________旁进行。培养基中的生长素用量与细胞分裂素用量的比值________(填“低”“高”或“相当”)时，有利于芽的分化。

【解析】　(1)植物芳香油的提取方法有蒸馏法、压榨法和萃取法等。薄荷油具有挥发性强的特点，可用水蒸气蒸馏法提取。

(2)在提取薄荷油的过程中，向得到的油水混合物加入NaCl后薄荷油将分布在上层。可用分液漏斗将两层分开。用无水Na2SO4将薄荷油中的水除去。

(3)接种前工作台需用体积分数70%的酒精擦拭一遍，接种操作需要在酒精灯火焰旁进行。培养基中生长素用量与细胞分裂素用量的比值低，有利于芽的分化。

【答案】　(1)萃取法　挥发性较强

(2)上层　分液漏斗　无水Na2SO4

(3)体积分数70%的酒精　酒精灯火焰　低

6.(2016·佛山市二模)牛奶中富含蛋白质，长期饮用有助于增强体质，但牛奶同时也是多种疾病的传播载体。国家标准是每毫升牛奶中细菌数小于30 000个。以下是牛奶消毒及细菌检测实验。

(1)图中步骤①称为________消毒法。步骤②是________。

(2)培养基中的蛋白胨可以为微生物提供________。进行步骤③操作时，应选用下列中的哪种工具?________。为了避免杂菌污染，此步骤应在______________附近进行。

(3)将接种后的培养基和作为对照的__________________同时放入37 ℃恒温培养箱中，培养36小时。取出后统计各平板的菌落数，结果如下表所示。应该选择其中稀释倍数为________的平板进行计数，经过消毒后的牛奶中，细菌数大约是________/mL。

牛奶稀释倍数 10-2 10-5 10-4 平板1菌落数 87 10 1 平板2菌落数 83 12 1 平板3菌落数 85 10 0 【解析】　(1)80 ℃恒温水浴15 min是巴氏消毒法，步骤②是进行系列稀释(或梯度稀释)。

(2)培养基中的蛋白胨可以为微生物提供碳源、氮源(和维生素)，③是接种，因为需要计数，需用稀释涂布平板法，接种工具是涂布器;为了避免杂菌污染，此步骤应在酒精灯火焰附近进行。

(3)统计各平板的菌落数时，应选择菌落数在30～300的计数，经过消毒后的牛奶中，细菌数大约是(87+83+85)÷3÷10-2=8 500个。

【答案】　(1)巴氏　系列稀释(或梯度稀释)　(2)碳源、氮源(和维生素)　B　酒精灯火焰　(3)一个未接种的培养基　10-2　8 500个