5.(2016·陕西省西安市质检)[生物——选修1：生物技术实践]

请回答与生物技术方面有关的问题：

(1)在果酒的制备过程中，若实验过程中发现榨取的果汁非常浑浊，解决的方法是________________________________________________________________________。

(2)菊花的组织培养常用的培养基是________，该实验操作成功的关键是__________________。

(3)在提取胡萝卜素时，常用的萃取剂具有沸点高又不与水混溶等特点。在鉴定胡萝卜素粗品时，常用________法，如果标准样品只形成一种色素带，而提取样品形成了多种色素带，其原因可能是_________________________________________________

________________________________________________________________________。

(4)用凝胶色谱法提取分离血红蛋白时，用_______________________________

____________洗涤红细胞，如果装填的凝胶色谱柱中出现气泡，气泡会________________，降低分离效果。

答案：(1)用果胶酶处理

(2)MS固体培养基　无菌操作(或无菌技术)

(3)纸层析　提取样品中含多种胡萝卜素

(4)生理盐水　搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序

6.(2016·湖北武汉调研测试)研究发现柚皮精油具有抑菌、抑制肿瘤等作用，是一种具有广阔开发前景的芳香油资源。青蒿素是目前公认的最有效治疗疟疾的药物，易溶于有机溶剂，60℃以上易分解。回答下列问题：

(1)柚皮精油可采用水蒸气蒸馏法提取，它是利用________将________较强的柚皮精油携带出来，形成油水混合物。在油水混合物中，加入________可使油水出现明显分层;分离得到的油层应加入________进行除水。

(2)水蒸气蒸馏易使柚皮精油有效成分部分水解，为避免此缺点，可采用________法提取柚皮精油。为提高出油率，需先对柚皮进行的处理是________________________，以分解果胶。

(3)青蒿素宜采用萃取法提取，现有四氯化碳(沸点76.5℃)和乙醚(沸点34.5℃)两种溶剂，应选用__________________作为萃取剂，不选用另外一种的理由是________________________________________________________________________。

解析：(1)水蒸气蒸馏法的原理是利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物。在油水混合物中加入NaCl，增加盐的浓度，从而使油水出现明显分层;分离的油层还会含有一定的水分，一般可以加入一些无水Na2SO4进行除水。(2)水蒸气蒸馏易使柚皮精油有效成分部分水解，为避免此缺点，可采用压榨法提取柚皮精油。(3)由题干信息可知，青蒿素在60℃以上易分解，故应选择低沸点的萃取剂进行提取。

答案：(1)水蒸气　挥发性　NaCl　无水Na2SO4

(2)压榨　石灰水浸泡

(3)乙醚　青蒿素在60℃以上易分解，应选择低沸点的萃取剂

7.红细胞含有大量的血红蛋白，我们可以选用猪、牛、羊或其他哺乳动物的血液来提取和分离血红蛋白，请回答下列有关问题：

(1)实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，经处理并离心，收集血红蛋白溶液。

①加入柠檬酸钠的目的是________。

②以上所述的过程为样品处理，它包括________、________、分离血红蛋白溶液。

(2)收集的血红蛋白溶液可以在透析袋中透析，这就是样品的粗分离。

①透析的目的是________________________________________________________。

②透析过程中需要用到________缓冲液。

(3)通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。

①凝胶色谱法是根据________分离蛋白质的方法。

②加入SDS可以使蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率完全取决于________________________________________________________________________。

解析：(1)柠檬酸钠是一种抗凝血剂，加入柠檬酸钠可以防止血液凝固;样品处理包括红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液。(2)透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内，透析可以去除样品中分子量较小的杂质。(3)凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的方法。

答案：(1)①防止血液凝固　②红细胞的洗涤　血红蛋白的释放

(2)①去除分子量较小的杂质　②磷酸

(3)①相对分子质量的大小　②分子的大小

8.PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，它能以极少量的DNA为模板，在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。如图是PCR过程示意图，请回答下列问题。

(1) PCR的中文全称是________。在PCR过程中先用95℃高温处理的目的是______________，而这一目的在细胞内是通过________实现的。

(2)引物是PCR过程中必须加入的物质，从化学本质上说，引物是一小段________。若将1个DNA分子拷贝10次，则至少需要在缓冲液中加入________个引物。

(3)图中引物延伸需______________作为原料。DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸，这是由于_____________________________________________________

________________________________________________________________________。

(4)试列举PCR技术在现实生活中的应用。

解析：(1)PCR又称多聚酶链式反应，在PCR过程中先用95℃高温处理的目的是使DNA分子双链之间的氢键断裂，两条链解开。(2)引物是一小段单链DNA或RNA。在DNA分子扩增时，需要2种引物，由于新合成的子链都需要引物作为复制的起点，故所需的引物数目等于新合成的子链数目，即2×210-2=211-2=2 046(个)。(3)PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，原料是四种脱氧核苷酸。

答案：(1)多聚酶链式反应　使DNA变性(使DNA的两条链解开)　解旋酶的催化

(2)单链DNA或RNA　2 046

(3)四种脱氧核苷酸　引物与DNA母链通过碱基互补配对结合，DNA聚合酶只能从引物的3′端开始延伸DNA链

(4)PCR技术在遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆等方面有着广泛的应用。(合理即可)