3.呈色反应

　　1)异羟肟酸铁反应(识别内酯)红色

　　香豆素在碱性条件下开环，与盐酸羟胺缩合生成异羟肟酸，在酸性条件下，再与Fe3+络合显红。

　　2)Gibb’s 反应&Emerson反应判断C6是否被取代

　　条件：有游离酚羟基，且其对位无取代者呈阳性

　　Gibb’s 反应显蓝色;Emerson反应显红色

　　4. 香豆素类的提取：碱溶酸沉法

　　香豆素类的分离：柱色谱分离一般采用硅胶为吸附剂，洗脱系统为水-甲醇(正相色谱)

　　(一) 香豆素的波谱学特性

　　1.紫外光谱UV下显蓝色荧光。

　　1)C7位导入-OH荧光增强

　　2)-OH醚化后荧光减弱 eg:有OCH3

　　3)7-羟基香豆素在C8位导入羟基，荧光消失

　　4)呋喃香豆素荧光较弱

　　2.1H-NMR

　　1)C3，C6，C8的H在较高场;C4，C5，C7的H在较低场 此处是H谱，不是C的电负性

　　2)C3，C4未取代：C3，6.2d;C4，8.0d，偶合常数较大J34=9.5Hz(香豆素)

　　C3，C4取代后呈单峰

　　鉴别：天然香豆素通常C3，C4通常没有取代(dd峰)

　　3)C7-OR取代：C3d，C6m，C8m移向高场

　　4)C5，C7二氧代：C6尖峰d，J=2Hz;C8与C4远程偶合钝峰d, J=2Hz

　　5)C7-OR&C6: C5,7.2s; C8,6.8s 远程偶合

　　C7-OR&C8：C5,7.2d; C6,6.8d;J5，J6=9Hz

　　3.NOE效应

　　对分子中空间相距较近的两核之一进行照射，使之达到跃迁饱和状态，此时记录另一核的核磁共振峰，可发现较无此照射时，谱峰强度增强。

　　照射某个氢核，与其空间相近的氢核产生的NOE效应有时不是特别明显，或者相邻的氢核与其它氢信号有重叠现象，则可测试NOE差光谱。

　　NOE差光谱：计算机进行两谱相减，一样的峰型相减为0，不一样的会出现负谱，观察现象来判断两种结构中的哪一种。

　　4.13C-NMR

　　当-OR取代时，连接的碳+30ppm;邻位碳-13ppm;对位碳-8ppm