1.(2015·全国卷Ⅰ)已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：

(1)显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用________染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用________(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取。

(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以________为碳源的固体培养基进行培养。

(3)若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用________直接计数;若要测定其活菌数量，可选用________法进行计数。

(4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35 ℃、40 ℃、45 ℃温度下降解10 g油脂所需酶量依次为4 mg、1 mg、6 mg，则上述三个温度中，________℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕________℃设计后续实验。

【解析】　(1)油脂可被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色，被苏丹Ⅳ染液染成红色，因此油脂通常用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染色。不易挥发的物质大多采用萃取法进行提取，水蒸气蒸馏法一般用来提取易挥发的物质。

(2)能产生脂肪酶的微生物B能利用脂肪(油脂)作为碳源，所以在制备选择微生物B的培养基时，应将油脂作为唯一的碳源。

(3)用显微镜直接对微生物进行计数，需要用血细胞计数板。如果对活菌进行计数，则要用稀释涂布平板法涂布平板，培养后统计菌落数目，然后计算出活菌数量。

(4)降解等量的油脂，需要的酶量越多，说明此温度下的酶的活力越小。所以三种温度中45 ℃下酶的活力最小。从三种温度下的实验结果可知，40 ℃下酶的活力最大，所以要想测定该酶的最适温度，应围绕该温度设计不同温度梯度，进行后续实验。

【答案】　(1)苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)　萃取法　(2)油脂　(3)血细胞计数板　稀释涂布平板　(4)45　40

2.受中医古籍《肘后备急方》中将青蒿“绞汁”用药的启发，屠呦呦采用低温提取的方法，从黄花蒿中直接提取得到青蒿素，是治疗疟疾的特效药。青蒿素易溶于有机溶剂，不溶于水，不易挥发，对热不稳定。回答下列问题：

(1)青蒿素的提取________(填“适宜”或“不宜”)采用水蒸气蒸馏法提取，原因是______________________________________________________。

(2)屠呦呦采用乙醚浸提法提取青蒿素，其提取流程与胡萝卜素的提取具有相似之处。在用乙醚浸泡提取前，要对黄花素茎叶进行________和干燥，以提高萃取效率;干燥过程应控制好________和干燥时间，以防止________。

(3)青蒿素是从野生植物黄花蒿中提取，曾被世界卫生组织称作是“世界上唯一有效的疟疾治疗药物”，这一实例表明了生物多样性的________价值。青蒿素还对癌细胞的生长具有显著抑制作用，它能诱导多种癌细胞的凋亡。细胞凋亡是由________所决定的细胞________的过程。

【解析】　(1)水蒸气蒸馏法适用于蒸馏挥发性物质，而青蒿素不易挥发，不能随水蒸气蒸馏出，且对热不稳定，所以水蒸气蒸馏法不适用提取青蒿素。

(2)由于青蒿素易溶于有机溶剂，不溶于水，从黄花蒿中提取青蒿素时，应采用萃取法，并且通常在提取前将黄花蒿茎叶进行粉碎和干燥，以提高萃取效率;干燥过程应控制好温度和时间，以防止青蒿素分解。

(3)从黄花蒿提取的青蒿素是“世界上唯一有效的疟疾治疗药物”，这一实例说明了生物多样性的直接价值。细胞凋亡是由基因所决定的细胞自动结束生命的过程。

【答案】　(1)不宜　青蒿素不易挥发，且对热不稳定　(2)粉碎　干燥温度　青蒿素分解　(3)直接　基因　自动结束生命

3.(2013·全国卷Ⅰ)回答下列有关泡菜制作的问题：

(1)制作泡菜时，所用盐水需煮沸，其目的是________。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的作用是 ___________。

(2)泡菜制作过程中，乳酸发酵的过程即为乳酸菌进行______________________的过程。该过程发生在乳酸菌细胞的________中。

(3)泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有________、________和________等。

(4)从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸。这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是________________________，原因是

__________________________________________________________。

【解析】　结合泡菜制作过程的相关知识回答问题。

(1)制作泡菜时需要先形成无菌环境，所用盐水需煮沸，以杀灭盐水中的杂菌。想要缩短制作时间，应该缩短菌株的生长时间，陈泡菜液中含有一定量的乳酸菌，这样菌体数量扩增速度会加快。

(2)乳酸菌为厌氧菌，进行无氧呼吸产生乳酸，该过程只能在细胞质中进行。

(3)温度过高、腌制时间过短、食盐用量不足等，容易造成杂菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。

(4)从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，氧气浓度逐渐降低，泡菜液逐渐变酸，不适宜杂菌生长，而适宜乳酸菌生长，因此乳酸菌数量增加，其他杂菌数量减少。

【答案】　(1)杀灭杂菌　增加乳酸菌数量　(2)无氧呼吸　细胞质　(3)温度　腌制时间　食盐用量　(4)乳酸菌数量增多，杂菌数量减少　乳酸菌比杂菌更为耐酸