第四节 药品质量标准分析方法的验证

　　熟悉药品质量标准分析方法验证中各项指标的定义和考察方法。

　　一般常用的分析效能评价指标包括：精密度、准确度、检测限、定量限、专属性、线性与范围、重现性、耐用性等;测定法的效能指标可评价分析测定方法，也可作为建立新的测定方法的实验研究依据。

　　1.准确度是指测得结果与真实值接近的程度，表示分析方法测量的正确性。

　　由于“真实值”无法准确知道，因此，通常采用回收率试验来表示。

　　制剂的含量测定时，采用在空白辅料中加入原料药对照品的方法作回收试验及计算RSD。

　　回收率=(平均测定值M -空白值B)/ 加入量A×100%

　　回收率的RSD一般应为2%以内。

　　2.精密度系指用该法测定同一匀质样品的一组测量值彼此符合的程度。它们越接近就越精密。在药物分析中，常用标准偏差(SD或S); 相对标准偏差(RSD)，也称变异系数(CV)表示。

　　3.专属性是指在样品介质中有其他组分共存时该分析方法对供试物质准确而专属的测定能力。

　　4.检测限(LOD)是指分析方法能够从背景信号中区分出药物时，所需样品中药物的最低浓度，无需定量测定。

　　LOD是一种限度检验效能指标，它既反映方法与仪器的灵敏度和噪音的大小，也表明样品经处理后空白(本底)值的高低。要根据采用的方法来确定检测限。当用仪器分析方法时，可用已知浓度的样品与空白试验对照，记录测得的被测药物信号强度S与噪音(或背景信号)强度N，以能达到S/N=2或S/N=3时的样品最低药浓为LOD;也可通过多次空白试验，求得其背景响应的标准差，将三倍空白标准差(即3δ空或3S空)作为检测限的估计值。如用非仪器分析方法时，即通过已知浓度的样品分析来确定可检出的最低水平作为检测限。

　　5.定量限 (LOQ)是指在保证具有一定可靠性(一定准确度和精密度)的前提下，分析方法能够测定出的样品中药物的最低浓度。

　　它反映了分析方法测定低药物浓度样品时具有的可靠性。它与上述的检测限的差别在于：定量限要定量测定某一药物在样品介质中的最低浓度，且定量限规定的最低浓度应该符合一定的精密度和准确度的要求。确定定量限的方法也因所用方法不同而异。当用非仪器分析方法时，与上述检测限的确定方法相同;如用仪器分析方法时，则往往将多次空白试验测得的背景响应的标准差(即空白标准差)乘以10，作为定量限的估计值，继之，再通过分析适当数量已知接近定量限或以定量限制备的样品来验证。

　　6.线性与范围

　　分析方法的线性是在给定范围内获取与样品中供试物浓度成正比的试验结果的能力。换句话说，就是供试物浓度的变化与试验结果(或测得的响应信号)成线性关系。

　　所谓线性范围是指利用一种方法取得精密度、准确度均符合要求的试验结果，而且成线性的供试物浓度的变化范围，对于含量测定要求一般浓度上限为样品最高浓度的120%，下限为样品最低浓度的80% (但应高于LOQ)。

　　7.耐用性 是指利用相同的方法在各种正常实验条件下对同一样品进行分析所得结果的重现程度。

　　所谓各种正常实验条件，包括不同的实验室、不同的分析人员、不同的仪器、不同批号的试剂、不同的测试耗用时间、不同的分析温度、不同的测定日期等等。分析方法重现性的测定是通过在不同实验室由不同的实验者(操作和环境条件虽有差别但仍在规定的分析参数内)对同一样品的分别测试而获得的。

　　评价一种分析方法的效能，一般根据方法的使用对象区别。有以下四种情况：

　　A.用于原料药中主要组分或制剂中有效组分含量测定的方法：除了检测限和定量限二项指标外，对精密度、准确度、选择性、线性与范围、耐用性等均应有所要求;

　　B.用于原料药中杂质测定或制剂中降解产物测定的方法又可分为两种：

　　①用于含量测定，除检测限不必要求外，对准确度、选择性、线性与范围、定量限、耐用性等均应有所要求;

　　②用于限度检查，只对检测限、专属性和耐用性三项指标有所要求，其余均无需要求。

　　C.用于溶出度测定的方法及药物释放度测定的方法，只有精密度和耐用性有所要求，其余项目均不作要求